肺癌组织中miR-30c侧翼区的单核苷酸多态性对其成熟进程的影响

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目的研究不同细胞和肺癌组织中miR-30c侧翼区单核苷酸多态性rs928508(A/G)对初级miR.30c(pri—miR-30c)、前体miR-30c(pre—miR-30c)、成熟miR-30c的表达水平以及miR-30e成熟进程的影响。方法构建含有不同基因型miR-30c侧翼区的报告基因表达载体pG13-promoter—miR-30e—A和pGL3-promoter—miR-30c—G,分别与内参质粒pRL—SV40共转染于人肺癌A549细胞、人胚肾293A细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)后,进行荧光素酶活性分析。采用Taqman基因分型技术对50例肺癌组织进行基因分型,以实时定量PCR法检测不同基因型组织标本中pri—miR-30c、pre—miR-30c、成熟miR-30c以及miR-30c宿主基因核转录因子Y(NFYC)的转录水平。结果在A549、293A和CHO细胞中,pG13-promoter—miR-30c—A组荧光素酶的活性与pGL3-promoter—miR-30c—G组比较,差异均无统计学意义(均P〉0.05)。荩因分型的结果昆示,50例肺癌组织中,AA基因型17例,AG基因型21例,GG基因型12例。在rs928508AG/GG基因型肺癌组织中,pre—miR-30c和成熟miR-30c的相对表达水平分别为1.306±0.878和0.384±0.227,均显著低于rs928508AA基因型组织的表达水平(分别为2.103±1.173和0.588±0.307,P=0.009和P=0.011)。而pri-miR-30c和NFYC基因在各基因型肺癌组织中的相对表达量差异均无统计学意义(P=0.335和P=0.393)。结论在肺癌组织中,miR-30c侧翼Ⅸ的单核苷酸多态性rs928508(A/G)可以影响pri-miR-30c→pre-miR-30c→成熟miR-30c的转化进程,但不能影响pri—miR-30c合成的转录进程。

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