球托霉菌促进猕猴桃植株生长和抗病性探究

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  研究背景
  猕猴桃植株栽培过程常因土壤中氮、钾、磷等元素不足,导致植株生长缓慢、产量低、抗病能力弱,易发细菌性溃疡等典型病害。而不合理施用化肥和农药又会带来果品品质下降、抗病性降低、农残超标、土壤板结及环境污染等问题。
  微生物肥料是以微生物的生命活动及其代谢产物为核心,使农作物获得特定肥料效应的一类肥料制品。与化肥相比,微生物菌肥应用于农业生产优势明显,如用量少、肥效持久、对人畜安全无毒、不污染环境,还能改善土壤结构和保护土壤微生物多样性等。不同种类作物需要的微生物菌肥种类也不尽相同,具体到猕猴桃栽培,目前还没有相应的专用菌肥产品。
  球托霉菌W对土壤中有效氮、磷敏感,本次课题的研究目的就是研究其是否能作为微生物肥料以促进猕猴桃生长。
  研究过程
  植株生长指标测定:选择120盆间苗移栽后猕猴桃植株,其中60盆用w5孢子悬浮液浇灌其培养基质,使孢子密度达到1500个/cm3,60盆浇灌无菌水作为接种实验的对照。浇灌接种后,每隔1个月随机抽取处理组和对照组各6盆,用常规方法测定植株高度,待处理与对照株高有差异后,测定猕猴桃植株叶片数、茎粗、地上部分和根系鲜重,并使用根系扫描仪扫描测定叶面积、根面积等植株生长指标。
  叶片叶绿素含量及其荧光参数的测定:采用叶绿素测定仪对猕猴桃植株完全展开的第2对真叶进行相对叶绿素含量测定。使用叶绿素荧光仪测定猕猴桃植株完全展开的第2对真叶的叶绿素初始荧光(Fo)、最大荧光(Fm)、最大荧光与初始荧光差值(Fv)、PSII原初光能转化效率(Fv/Fm)、PSII潜在活性(Fv/Fo)、非光化学淬灭值(NPQ)及光化学淬灭值(qP)。
  猕猴桃叶片光合作用测定:使用光合仪测定猕猴桃叶片光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度及蒸腾速率。
  W5接种后猕猴桃植株细菌性溃疡病抗性测定:用无菌牙签从猕猴桃植株细菌性溃疡病菌株JF8单菌落挑取致病菌少量,戳刺猕猴桃实生苗茎部第1对真叶和第3对真叶之间,深达木质部;用无菌水作对照,接种方法同上。将接种后的猕猴桃植株置于温度20℃光照培养箱中培养。接种后1周,观察其发病情况。
  除此之外,还分别对样品进行了糖含量测定、W5生长碳源测定、菌丝侵染率测定、根际土壤有效磷含量测定等。
  结果与分析
  接种w5对猕猴桃植株生长指标的影响:接种w5菌株60天后,猕猴桃生长株高显著高于对照组。此时对猕猴桃其他各项生理指标进行测定。结果显示,w5处理60天后猕猴桃植株叶片数、茎粗、地上部分和根系鲜重、叶面积、根面积等生理指标均大于对照组猕猴桃。结果表明,接种w5至猕猴桃植株根部能够促进猕猴桃植株的整体生长,特别是根系和叶片的生长。
  接种w5对猕猴桃植株光合作用的影响:处理组SPAD值(Soil and plant analyzer development,土壤与作物分析开发,指一种测量浓度的方法。叶绿素含量SPAD,指用SPAD法测量的叶绿素浓度)为22.572±1.148,显著高于对照组的18.988±1.549,表明接种w5可增加植株叶片中叶绿素含量。对猕猴桃叶片叶绿素荧光测定结果显示,对照组和实验组的叶绿素初始荧光(Fo)、最大荧光(Fm)、最大荧光与初始荧光差值(Fv)差异不显著然而,实验组在Psn原初光能转化效率(Fv/Fm)和光化学淬灭值(qP)显著高于对照组,说明w5处理后提高了叶片叶绿素原初光能转化效率。叶片的光合作用效率测定结果显示,处理组猕猴桃叶片的胞间CO2浓度和蒸腾速率均显著高于对照组,说明接种w5促进了叶片的光合作用。
  接种后猕猴桃植株对细菌性溃疡病抗性测定结果:接种致病菌后10天开始观察到叶片病斑,接种后15天,病斑显著。接种1个月后测量茎上病斑面积,结果显示,处理组溃疡病病斑面积显著小于对照组,说明其溃疡病抗性高于对照组。
  w5生长碳源:与葡萄糖和果糖相比,以蔗糖为碳源时,w5在液态培养条件下菌丝体增长最快,为最适碳源。w5菌株对不同碳源的利用效率为蔗糖
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