生理和药理浓度下1,25(OH)2D3对软骨细胞增殖、成熟和钙化的影响研究

来源 :中国实用口腔科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:angel5tears
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目的体外观察生理和不同药理浓度的1,25(OH)2D3对原发性股骨头软骨细胞(femoral chondrocytes,FCs)和继发性髁突软骨细胞(condylar chondrocytes,CCs)增殖、成熟和钙化的影响。方法通过分离培养1周龄雌性SD仔鼠的FCs和CCs,体外分为6组:(1)空白对照组(不做处理);(2)溶剂组(0.01%酒精处理);(3)~(6)分别为0.1、1、10、100 nmol/L 1,25(OH)2D3处理组。各组按相应处理因素处理24 h后通过CCK8检测对2种软骨细胞增殖能力的影响,并对增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、Ⅱ型胶原(collagenⅡ,COLⅡ)以及X型胶原(collagen X,COL X)进行q RT-PCR和Western blot检测。结果 (1)CCK8检测结果显示,1,25(OH)2D3呈浓度依赖性抑制2种软骨细胞的增殖,且CCs的抑制率较FCs明显;PCNA的qRT-PCR和Western blot检测结果与之基本一致。(2)相对于空白对照组,体外生理浓度(0.1 nmol/L)的1,25(OH)2D3对2种软骨细胞COLⅡ的表达影响差异无统计学意义(P>0.05),药理浓度(1、10、100 nmol/L)的1,25(OH)2D3可上调2种软骨细胞COLⅡ的表达,其中FCs最佳浓度在10 nmol/L,而CCs呈浓度依赖性上升。(3)相对于空白对照组,1,25(OH)2D3对2种软骨细胞COL X的m RNA和蛋白水平表达均无统计学意义(P>0.05)。结论体外1,25(OH)2D3呈浓度依赖性抑制软骨细胞增殖,药理浓度的1,25(OH)2D3可促进软骨细胞成熟,且其对CCs的影响较FCs显著;而其对2种软骨细胞的钙化无影响。
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