稳定表达Wnt3a基因的猪胰腺干细胞株的建立

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fspdgx

【摘要】

：

Wnt3a是经典Wnt通路上游的一个重要分泌蛋白，Wnt3a蛋白的活化可促进多种细胞的增殖和分裂。为了揭示Wnt3a在猪胰腺干细胞（PSC）增殖及分化中的调控机理，采用RT—PCR从pGKS2P（＋）-Wnt3a

【作者】

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彭莎张军林

【机构】

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西北农林科技大学动物医学院,陕西省干细胞工程技术研究中心陕西省农业分子生物学重点实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2012年11期

【关键词】

：

WNT3A pIRES2-AcGFP1 重组质粒胰腺干细胞(PSC) Wnt3a pIRES2-AcGFP1 Recombinant plasmid P

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（NSFC,31101775）和高等学校博士学科点专项科研基金（SRFDP,20100204120020）

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Wnt3a是经典Wnt通路上游的一个重要分泌蛋白，Wnt3a蛋白的活化可促进多种细胞的增殖和分裂。为了揭示Wnt3a在猪胰腺干细胞（PSC）增殖及分化中的调控机理，采用RT—PCR从pGKS2P（＋）-Wnt3a质粒中扩增出Wnt3a全长片段，将测序正确的Wnt3a连接到带有水母绿色荧光蛋白（AcGFP1）报告基因的真核表达载体pIRES2-AcGFP1中，构建重组质粒。经EcoRI／BamHI酶切鉴定后，用脂质体转染至猪PSC。用抗生素G418筛选3周后获得稳转pIRES2．AcGFP1．Wnt3a的细

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