红花機木LcFLS1基因的克隆及其表达与转化研究

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong474
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该研究以红花橙木(Loropetalum chinense var.rubrum)为材料,根据转录组测序结果和PCR方法克隆到1个黄酮醇合成酶(FLS)同源基因,命名为LcFLS1.生物信息学分析显示,LcFLS1的开放阅读框为996 bp,编码331个氨基酸.氨基酸序列分析显示,LcFLS1具有典型的2-酮戊二酸和铁依赖性双加氧酶结构域;蛋白结构预测表明,球形蛋白结构的核心区域存在10个与2-酮戊二酸配体互作的位点.进化树分析结果表明,LcFLS1与茶树(Camellia sinensis)等木本植物的亲缘关系较近,而与拟南芥(Arabidopsis thaliana)等草本植物的亲缘关系较远.荧光定量PCR检测显示,LcFLS1在红花機木的花中相对表达量最高,而在茎中最少.成功构建了LcFLS1基因的过表达载体pLcFLS1-SUPER1300,经农杆菌侵染花序法将pLcFLS1-SUPER1300质粒转入拟南芥中获得转基因植株,PCR鉴定表明获得了转LcFLS1基因拟南芥阳性植株.该研究结果为红花橙木黄酮醇的生物合成机制研究,以及药用价值的开发利用奠定了基础.
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