葡萄柚基因组DNA提取方法的比较及ISSR-PCR体系的优化

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对4种基因组DNA提取方法进行比较,得到一种效率较高的、且适用于葡萄柚ISSR-PCR的DNA提取方法。同时,采用正交设计对影响葡萄柚ISSR-PCR的因子进行优化。实验结果表明,改良的SDS法提取的基因组DNA最适宜进行葡萄柚的ISSR-PCR扩增。ISSR-PCR产物在2%琼脂糖凝胶上检测,发现PCR扩增的平均条带数为2.7条。葡萄柚的最优ISSR-PCR反应体系为:20μL总体积中含有2×buffer(Mg2+),0.2mmol/L dNTPs,0.2μmol/L引物,0.3U Taq D
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