PCR—RFLP筛选DNA文库克隆Btcry基因的研究

来源 :中国农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxiihhaa
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Bt菌株C002对水稻二化螟、甜菜夜蛾具有高毒力,PCR-RFLP鉴定含有cry1Aa、cry2Ab、cry1Ca和未知杀虫蛋白基因cryX等,其中cry1Ca位于染色体DNA 6~9kb的EcoR Ⅰ片段.染色体和质粒DNA分别经EcoRⅠ完全酶切和Sau3AⅠ部分酶切、电泳回收6~9kb片段.E.coli-Bt穿梭载体pHT315分别与目的DNA连接、转化大肠杆菌感受态细胞后获得了相应的DNA文库.约50个转化子合为一个转化子池,采用PCR-RFLP方法快速检测,分别从约2 000质粒DNA文库转化子
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