【摘 要】
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目的为进一步研究神经生长因子( β-NGF) 及其基因的结构及功能奠定基础.方法自行设计合成一对特异引物,直接从人血细胞基因组DNA中 PCR扩增出NGF基因片段,克隆至pGEM-T Easy
【机 构】
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广州市中国人民解放军第四五八医院肝病研究所免疫生化室,四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学研究所,UniversityofMaryland
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目的为进一步研究神经生长因子( β-NGF) 及其基因的结构及功能奠定基础.方法自行设计合成一对特异引物,直接从人血细胞基因组DNA中 PCR扩增出NGF基因片段,克隆至pGEM-T Easy载体,pGEM-T-NGF克隆片段再定向插入原核表达载体pGEX-5T,构建的重组体p5TNF转化大肠杆菌JM109并经IPTG诱导表达.结果经限制性酶谱和DNA测序确证,pGEM-T-NGF克隆片段为β-NGF全长编码序列 (380bp);SDS-PAGE、分光光度计扫描和Western印迹显示,p5TNF转化菌有
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