【摘 要】
：
目的:建立表皮生长因子突变体Ⅲ胞外区(EGFRvⅢex)的NIH3T3稳定细胞系并分析其免疫原性.方法:将编码EGFRvⅢex基因的表达质粒pLNCX2-EGFRvⅢex转染NIH3T3细胞后, 用G418筛选
【机 构】
：
皖南医学院生物化学教研室,上海市肿瘤研究所
【基金项目】
：
上海市科学技术委员会专项基金重点项目;
论文部分内容阅读
目的:建立表皮生长因子突变体Ⅲ胞外区(EGFRvⅢex)的NIH3T3稳定细胞系并分析其免疫原性.方法:将编码EGFRvⅢex基因的表达质粒pLNCX2-EGFRvⅢex转染NIH3T3细胞后, 用G418筛选阳性克隆, 得到多个细胞克隆.采用免疫组化和Western blot法鉴定这些细胞克隆.选取高表达EGFRvⅢex的细胞株(命名为3T3-vⅢex)免疫BALB/c小鼠, 制备抗血清.用ELISA、Western blot和免疫荧光分别检测抗血清的效价和特异性.结果:成功地构建了真核表达载体pLNCX2-EGFRvⅢex并获得了稳定高表达EGFRvⅢex的NIH3T3细胞系3T3-vⅢex.用3T3-vⅢex免疫小鼠所获得的抗血清效价为10 -5.Western blot和免疫荧光鉴定证明抗血清可以与EGFRvⅢex特异结合.结论:人EGFRvⅢex可在NIH3T3细胞内获得稳定表达, 以其免疫小鼠可以获得高效价、高特异性的抗血清.
其他文献
女婴 ,４０ｄ,以“发热腹泻３ｄ,腹胀１ｄ”入院。无诱因发热 ,高达３９℃ ,伴腹泻 ,黄色水样大便 ,日１０余次 ,量中 ,服“保婴丹”后体温在３８℃左右 ,１ｄ前出现腹胀 ,哭闹不安 ,吮乳时可安静。无流涕咳
炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一组病因不明的慢性非特异性肠道炎症性疾病,以溃疡性结肠炎(ulcrative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn s disease,CD)最为常见
以河南大学体育学院320名学生为调查对象、对学生的营养及饮食行为态度进行调查研究.结果表明:学生的营养状况较好,但饮食习惯存在一定问题:主要是营养观念淡薄,知识贫乏；部分
文章对沈阳理工大学工商管理类研究生实践能力状况及其培养中存在的问题进行研究,并提出完善研究生实践能力培养的对策建议。
This article studies the practical ability
通过对已有文献提出的恶意代码检测方法进行分析改进,提出一种基于行为的静态分析、动态监视和攻击树匹配相结合的文件风险评估的方法。根据文件类型分别从静态和动态两个方
目的提高对复发性风湿症临床特点、治疗方法和预后的认识。方法分析63例复发性风湿症患者的临床资料,观察他们对治疗的反应并对其进行1.5～3年的随访。结果本组患者平均发病年
目的观察COX-2选择性抑制剂NS398的对肾癌细胞增殖和凋亡作用的影响及其作用机制。方法采用标准的细胞培养方法对人肾癌786-0细胞进行培养,将NS398分别以25、50、100、150、2
目的 探讨超声心动图检测慢性阻塞性肺病(COPD)患者左心室功能和COPD病程的可行性. 方法 采用Sequoia 512彩色超声诊断仪,记录21例COPD患者及50名健康人自然呼吸时二尖瓣口E
目的探讨褪黑素(melatonin,MLT)对新生儿脐带血单个核细胞(cord bloodmononuclear cells,CBMC)活化增殖的影响。方法运用相差显微镜及~3 H-TdR 掺入法观察 MLT 对CBMC形态学
目的通过分析慢性高血压合并妊娠患者的母儿结局,探讨导致母儿不良预后的高危因素。方法 2000年1月至2005年12月北京大学第一医院分娩产妇14 127例,其中慢性高血压合并妊娠患