【摘 要】
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目的构建SARS冠状病毒 (SARS-COV)核蛋白(N)与mGM-CSF的融合真核表达质粒,借助mGM-CSF的免疫佐剂作用,提高SARS DNA疫苗的免疫效果.方法采用PCR方法扩增N和mGM-CSF基因片段,
【机 构】
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军事医学科学院微生物流行病研究所,军事医学科学院微生物流行病研究所,宁夏医学院微生物学教研室
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目的构建SARS冠状病毒 (SARS-COV)核蛋白(N)与mGM-CSF的融合真核表达质粒,借助mGM-CSF的免疫佐剂作用,提高SARS DNA疫苗的免疫效果.方法采用PCR方法扩增N和mGM-CSF基因片段, 用分子克隆和基因融合的方法将目的片段定向插入真核表达载体中,构建融合表达质粒pVAX 1/N-mGM-CSF, 并以融合质粒转染细胞,用免疫细胞化学和Western Blot的方法鉴定融合质粒在体外的表达.结果经酶切鉴定及DNA序列测定证实融合质粒构建正确,细胞转染实验表明,融合质粒能在COS
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