Kir2ds4基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

来源 :中国实验血液学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：oskarguan

【摘要】

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本研究旨在构建kir2ds4基因RNAi慢病毒载体。针对已经筛选确定的kff2ds4基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的OligoDNA，退火形成双链DNA，与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6

【作者】

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窦立萍达万明王畅康慧媛赵瑜孙敬芬靳海杰王全顺

【机构】

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中国人民解放军总医院血液科

【出处】

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中国实验血液学杂志

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

RNA干扰kir2ds4基因慢病毒载体 RNA interference kir2ds4 gene lentiviral vector

【基金项目】

：

全军医学科研重大项目,编号01MB068

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本研究旨在构建kir2ds4基因RNAi慢病毒载体。针对已经筛选确定的kff2ds4基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的OligoDNA，退火形成双链DNA，与经HpaI和XhoI酶切后的pSicoR-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白（GFP）]连接产生LV-shkir2ds4慢病毒载体，应用PCR筛选阳性克隆并进行测序鉴定。用LV-shkir2ds4，包装系统质粒共转染包装细胞293T细胞，产生慢病毒颗粒，以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果表明，PCR和测序结果证实成功地构建了k

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