pcDNA3.1-Pax6载体的构建及其对胶质瘤细胞增殖的影响

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目的:构建pcDNA3.1-Pax6过表达质粒并观察其对胶质瘤U251细胞增殖的影响.方法:以K562细胞cDNA为模版,采用RT-PCR的方法扩增Pax6基因,将扩增产物酶切回收后与同样酶切回收的真核表达载体pcDNA3.1连接、转化,构建pcDNA3.1-Pax6重组质粒,再经菌落PCR、酶切及测序鉴定重组质粒;利用脂质体li-pofectamine2000转染重组质粒至U251细胞.Real-timePCR检测Pax6mRNA的表达水平,Westernblot检测PAX6蛋白的表达,MTT法检测U2
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