结缔组织生长因子对人肾小管上皮细胞转分化影响的研究

来源 :中华肾脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljc1007
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目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)在人类肾小管上皮细胞转分化中的作用.方法将体外培养的人近曲小管上皮细胞(HKC)分为3组:(1)对照组;(2)小剂量CTGF组:培养液中加入重组人CTGF(rhCTGF),终浓度为2.5 ng/ml;(3)大剂量CTGF组:rhCTGF终浓度为5.0 ng/ml.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定HKCα-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤连蛋白(FN)mRNA水平的变化.间接免疫荧光方法检测HKC α-SMA的表达.流式细胞仪检测α-SMA阳性细胞百分率.ELISA方法测定培养液上清中FN的浓度.结果不同浓度rhCTGF作用于HKC 24 h后,α-SMA和FN mRNA水平显著升高(P<0.01).刺激48 h后,胞浆α-SMA蛋白表达明显增强,流式细胞仪测得3组细胞α-SMA阳性百分率依次为:2.4%、38.9%、65.5%(P<0.01);ELISA结果显示,rhCTGF能促进HKC分泌FN,且呈剂量依赖性(P<0.01).结论CTGF在体外能刺激肾小管上皮细胞向肌成纤维细胞(MyoF)转分化,并促进其合成细胞外基质(ECM).

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