磁珠富集法筛选马尾松微卫星标记

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将马尾松核基因组DNA用Sau3AⅠ酶切后,电泳回收300~1000bp片段。在回收的片段上连接接头;PCR后与用生物素标记的微卫星探针(AC)15、(AG)15杂交;运用磁珠富集含有微卫星序列的DNA片段。将获得的序列通过PCR扩增后,连接pGEM-T载体,转化入感受态大肠杆菌,得到微卫星序列文库。然后用PCR法直接对文库进行扩增,获得58个阳性克隆,经测序分析,获微卫星序列33个,并成功设计出马尾松微卫星引物19对。
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