【摘 要】
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目的:利用MT-II启动子的Zn2+诱导表达特性,构建含多克隆位点的可诱导型真核表达载体Pmdna3-neo,并用荧光素酶报告基因(luc)检测其表达效率.方法:用分子克隆方法构建载体,并将
【机 构】
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第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,第四军医大学基础部化学教研室
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目的:利用MT-II启动子的Zn2+诱导表达特性,构建含多克隆位点的可诱导型真核表达载体Pmdna3-neo,并用荧光素酶报告基因(luc)检测其表达效率.方法:用分子克隆方法构建载体,并将luc基因克隆到其多克隆位点内,转染胃癌细胞SGC7901,G418筛选出稳定克隆,分别在不同浓度ZnSO4及不同诱导时间下进行诱导表达和测定,并检测不同单细胞株的表达效率.结果:采用160μmol/L ZnSO4诱导24h可达到最高表达量,比基准值高2～7倍(P
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