【摘 要】
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在大肠杆菌磷酸转移酶系统中，葡萄糖主要由ptsG基因编码的酶ⅡCB^Glc转运入细胞。利用代谢工程技术构建ptsG基因缺陷株，有望降低葡萄糖的摄取速率，减少乙酸累积，促进菌体生长。运
【机 构】
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军事医学科学院生物工程研究所,沈阳药科大学
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在大肠杆菌磷酸转移酶系统中，葡萄糖主要由ptsG基因编码的酶ⅡCB^Glc转运入细胞。利用代谢工程技术构建ptsG基因缺陷株，有望降低葡萄糖的摄取速率，减少乙酸累积，促进菌体生长。运用PCR技术，扩增出两翼与ptsG基因上下游序列同源，中间为氯霉素抗性基因的DNA片段。经电转化，将外源DNA片段分别转入Escherichia coli DH5a、JM109中。在Red重组酶的作用下，外源DNA片段与染色体上同源区域重组，将基因ptsG敲除，构建ptsG基因缺陷株：DH5αP，JM109P。在LB培养基中，
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