【摘 要】
:
目的 获得可溶性抗人SSA抗原表位特异性单链抗体(ScFv).方法 以赖氨酸为支架八倍体合成3条相对分子质量为60 000的SSA抗原氨基酸多肽链(MAP):MAP 482~493(P1表位)、MAP 310~323
【机 构】
:
内蒙古医学院附属医院风湿免疫科,北京协和医院风湿免疫科
论文部分内容阅读
目的 获得可溶性抗人SSA抗原表位特异性单链抗体(ScFv).方法 以赖氨酸为支架八倍体合成3条相对分子质量为60 000的SSA抗原氨基酸多肽链(MAP):MAP 482~493(P1表位)、MAP 310~323(P2表位)和MAP 230~241(P3表位).以P1~P3表位为包被抗原,富集筛选相应的噬菌体单克隆抗体(McAb);阳性克隆特异性、亲和力和序列分析鉴定;表位特异性McAb可溶性表达和鉴定.结果 5轮筛选后,获得了抗3种表位抗体的含完整插入片断的克隆株,具有较高亲和力和特异性.抗P1~P3抗体融合蛋白与相应表位反应的410 nm吸光度值分别为1.43±0.23、0.82±0.31、0.80±0.25,组间交叉反应差异有统计学意义(P值均小于0.01).其中3个克隆表位特异性McAb-ScFv克隆成功,可溶性表达并纯化.以Hep-2细胞为底物,间接免疫荧光法(ⅡF)检测显示,可溶性ScFv抗体具有在体活性.结论 筛选获得的阳性克隆成功,可溶性表达并具有较好的亲和力、特异性和在体活性,可胜任靶器官的表位表达情况的检测.
其他文献
目的:探讨磁共振椎管水成像(magnetic resonance myelography,MRM)在腰椎管内疾患的成像特点及诊断价值.方法:根据132例行手术治疗的腰椎疾患患者术前MRM检查做出诊断,对比术
目的 研究肝上皮样血管平滑肌脂肪瘤的影像特征,以减少对该病的误诊.方法 对8例经手术病理证实为肝脏上皮样血管平滑肌脂肪瘤的临床及影像学资料进行回顾性分析.女6例,男2例
目的 探讨膳食纤维对炎性肠病(IBD)大鼠肠黏膜屏障的影响.为临床肠内营养提供实验依据.方法 应用乙酸灌肠法制作大鼠IBD模型.96只SD大鼠成模后分为3组.分别饲以不含膳食纤维
总结50例严重高胆红素血症患儿的临床资料,分析换血方法和换血过程中出现的护理问题,认为采用滴注式输血泵进行全自动放血和输血是经外用动静脉换血曩有效的方法,熟练的动脉
目的 制备N-软酯酰基壳聚糖微泡(PCMB)类超声造影剂,评价其超声对比成像效果.方法 以N-软酯酰基壳聚糖为膜材料采用声振法制备PCMB造影剂,用光学显微镜、库尔特计数仪、Zeta
目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b
叶酸(盐)是人类健康、生长发育必需的维生素,作为辅助因子或辅酶,叶酸在基因组的维持与修补、基因表达的调控、氨基酸代谢、髓鞘生成与神经递质如5-羟色胺、儿茶酚胺及褪黑素
目的 观察肝脏脂肪含量(LFC)与胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能的关系.方法 109例受试者分为糖调节受损组(IGR,31例)、新诊断2型糖尿病组(NT2DM,31例)和正常对照组(NC,47例),采
目的观察溃疡平对胃溃疡大鼠胃黏膜组织血管内皮生长因子(VEGF)和血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)mRNA表达的影响,探讨溃疡平促进大鼠胃溃疡愈合的机制。方法采用改良Okabe法
2006年8月17日国务院办公厅印发的《安全生产“十一五”规划》中明确提出“要开展化学工业园区域风险评价和安全规划”,全国各地化学工业园相继开展区域安全评价。笔者结合自