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[摘要] 目的 探讨诱导痰嗜酸粒细胞（EOS）检查在支气管哮喘患者管理中的应用价值。 方法 选择我院2012～2013年呼吸科收治的90例支气管哮喘患者的资料，患者经治疗，根据哮喘控制测试及肺功能按全球哮喘防治倡议，均达到停药标准，同时患者行诱导痰嗜酸性粒细胞检查，根据患者嗜酸性粒细胞含量分为观察组（嗜酸性粒细胞>1%，50例）及对照组（嗜酸性粒细胞<1%，40例），随访4周，比较两组患者控制哮喘测试及肺功能指标。 结果 观察组患者ACT测试达标率低、肺功能指标差，与对照组患者比较差异有统计学意义。 结论 EOS是导致哮喘的主要炎性细胞，诱导痰EOS可作为支气管哮喘患者病情监测的重要指标。
[关键词] 嗜酸粒细胞；支气管哮喘；诱导痰
[中图分类号] R562.25 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）05-70-03
支气管哮喘是临床上非常常见的呼吸道疾病，其以气道出现慢性炎症、气道高反应为主要特点[1]，常见的症状为发作性气急、喘息、咳嗽、胸闷等。支气管哮喘对患者产生巨大的影响，可导致活动、运动受限，甚者误学、误工，哮喘反复发作能够导致慢性阻塞性肺疾病的发生，破坏人体的健康，如果其急性发作救治不当更会致命，因此引起全球的广泛关注[2]。支气管哮喘是由多种细胞、细胞因子参与的变态反应，其中嗜酸性粒细胞（EOS）在急性发作
中起到最为主要的作用，诱导痰EOS能够监测支气管哮喘患者病情，为治疗提供指导。我院在支气管哮喘患者中采用诱导痰嗜酸粒细胞检查进行监测病情取得了较好的效果，现总结报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2012～2013年呼吸科收治的90例支气管哮喘患者的资料，均符合2004年修订的哮喘诊断标准[3]，其中男46例，女44例，年龄22～46岁，平均（32.2±7.6）岁；所有患者经治疗后，根据哮喘控制测试及肺功能按全球哮喘防治倡议，均达到停药标准，同时患者行诱导痰嗜酸性粒细胞检查，
痰诱导检测诱导进行前10min患者吸入沙丁胺醇400?g；患者清水漱口、扪鼻后进行3%高渗盐水超声雾化吸入，时间以15min为宜，如果无痰咳出可以延长雾化的时间，一般不超过半小时，将痰咳出到培养皿内。选取足量痰标本置于EP管内，加入痰重量大于4倍体积的0.1%DTT；置于37℃水浴10min时间，漩涡振荡1～2次，300目滤网过滤谈混悬液后，3000转离心机离心10min，接着弃掉上清液，将沉淀物进行涂片，HE染色，封片，计算出各细胞的比例。根据患者嗜酸性粒细胞含量分为观察组（嗜酸性粒细胞>1%，50例）及对照组（嗜酸性粒细胞<1%，40例），两组患者性别组成、年龄差异等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
对两组患者停药随访4周以后进行哮喘控制测试（ACT）[4]，测定第一秒用力呼气容量和呼出50%与75%肺活量时的最大呼气流量。
1.2.1 哮喘控制测试 回忆近4周的情况并回答包括呼吸急促、急救药物的使用、哮喘对生活与工作的影响、夜间觉醒、患者对哮喘控制的标化等对非控制哮喘进行预测的相关指标的问题，每一个问题均采用5分标尺法进行评估，从1～5分，分数越高哮喘控制越好，总分共25分：完全控制；20～24分：部分控制；<24分：未得到控制。哮喘控制达标率=（完全控制例数+部分控制例数）/总例数×100%。具体哮喘控制测试表见表1。
1.2.2 肺功能检测 采用Quark PFT4大型组合式肺功能仪常规方式检测，操作流程符合美国胸科协会（ATS）、欧洲呼吸协会（ERS）标准。检测指标有FEV1，PEF，FEF25%和FEF50%。FEV1/FVC不小于70%提示肺通气正常，FEF25%和FEF50%均小于正常预计值的80%说明小气道功能有异常[5]。
1.3 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件进行数据处理，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组ACT测试结果比较（表2）
3 讨论
支气管哮喘简称哮喘，其是由多种因素所致的气道慢性变态反应性的炎症性疾病，从而使气道平滑肌收缩、痉挛[5]，所以主要的临床表现为反复发作的气急、喘息、咳嗽、胸闷等症状，其在临床上非常常见，全球约有3亿的患者，我国更是超过1500万[6]。哮喘病程很長，可达十几年甚至几十年，病程越长，气道重塑愈加明显，气道阻塞的可逆转性愈小[7]，这种在呼气相存在的通气功能障碍，导致肺泡内的气体发生滞留，肺泡在这种长期过度膨胀下弹性降低，最终发展成为慢性阻塞性肺疾病，甚至肺源性心脏病[8]，在给患者带来巨大痛苦的同时更成为患者家庭和社会的沉重经济负担，因此其得到了全球学者的普遍关注。
目前临床上主要通过症状、体征、支气管激发试验、肺功能、哮喘控制测试等中和情况来诊断支气管哮喘，并对其病情作出评估。其中肺功能检查在哮喘发作时，呼吸流速的相关指标均会显著下降[9-13]，如第一秒用力呼气量（FEV1）、FEV1占用力肺活量（FVC）比值（FEV1/FVC%）、呼出50%与75%肺活量时的最大呼气流量（MEF50%、MEF75%）等均会减小，同样在哮喘缓解期以上指标亦会好转。而哮喘控制测试（ACT）通过问卷的形式询问有关哮喘症状、生活质量的问题以进行综合判定，更可以作为肺功能检查的补充[10]。
但是许多的实验证明了哮喘的临床症状、肺功能的改变远远晚于实验室检查中的改变，同时大量支气管舒张药物的应用更可以掩盖气道中持续性的炎症，因此不能仅仅通过肺功能的好转、哮喘症状的控制作为判断气道炎症控制情况的标准[11]。 研究发现，哮喘气道炎症的实质就是各种炎性细胞的浸润以及细胞因子对气道壁的损伤，其中嗜酸性粒细胞（EOS）是最主要的炎细胞[14-15]，由于是在气道内局部的炎细胞浸润，其更较血液中的EOS更有敏感性。
本组研究中发现，在达到停药标准后进行诱导痰嗜酸性粒细胞检查仍发现EOS增高，更加证实了通过肺功能的好转、哮喘症状的控制作为判断气道炎症控制情况是不可行的，同时在随访4周后观察组肺功能指标FEV1/FVC为（0.82±0.04），FEF25%～75%为（77.2±9.6），ACT达标率为80.7%，对照组肺功能指标FEV1/FVC为（0.86±0.03），FEF25～75%为（90.0±10.16），ACT达标率为87.5%，亦证实了EOS是引起哮喘气道炎症的重要细胞。
综上所述，诱导痰嗜酸性粒细胞检查可作为支气管哮喘患者病情监测的重要指标，只有气道炎症得到有效控制，才能减少哮喘的再次发作，从而提高患者的生活质量。
[参考文献]
[1] 匡玉宝，黄英河.支气管哮喘患者治疗前后ECP和E0S对比分析[J].当代医学，2010，16（28）：98.
[2] 陶绍华，杨恂.诱导痰嗜酸性粒细胞阳离子蛋白对支气管哮喘的诊断价值[J].现代临床医学，2013，39（5）：343-344， 346.
[3] 陈峰，朱杰，陈金亮，等.黄芪注射液对支气管哮喘诱导痰、血液嗜酸性粒细胞的影响[J].交通医学，2012，26（6）： 603-604.
[4] 姜庆利，靳英丽，李晓辕，等.呼出气一氧化氮测定在老年支气管哮喘诊断中的价值[J].中国老年学杂志， 2013，33（4）：941-942.
[5] Rosi E，Ronchi MC，Grazzini M，et al.Sputum analysis，bronchial hyperresponsivness，and airway function in asthma：Results of a factor analysis[J].J allergy Clin Immunol，2011，103（31）：232-237.
[6] 孙艳菊，张三山，王林娥，等.H1阻滞剂鼻喷剂联用吸入激素对哮喘患者诱导痰嗜酸细胞及炎症因子的影响[J].中国现代医生，2012，50（20）；54-56，59.
[7] Lehmann S，Bakke PS，Eide GE，et al.Clinical data discrinfinating between adults with positive and negative results on bronchodilator testing[J].Int J Tuberc Lung Dis，2010，12（2）：205-213.
[8] 袁仕伟，郑卫东，吴宏杰.支气管哮喘急性发作期嗜酸细胞阳离子蛋白及炎症相关因子检测的临床意义[J].中国医药导报，2012，9（17）：26-27.
[9] Nonmra N，Yoshikawa T，Kamoi H，et al.Induced sputum analysis in asymptomatic young adults with bronchial hyperresponsiveness to methacholine[J].Respirology，2007，12（4）：516-522.
[10] 罗炜，王慧，陈如冲，梁健鹏.嗜酸粒细胞性支气管炎和哮喘患者诱导痰微量元素的变化及意义[J].检验医学与临床，2012，9（10）：1158-1159.
[11] 甘明，易運林，李小玲，等.支气管哮喘患者诱导痰EOSECP及血清IL一13水平检测及其意义[J].检验医学与临床，2012，9（5）：578-580.
[12] 孔炜，汪晓莺.支气管哮喘患者外周血白细胞介素19水平及其临床意义[J].南京医科大学学报（自然科学版），2007，27（5）：499-501.
[13] 何忠红.高渗盐水诱导痰液用于重度哮喘缓解期患者的安全性研究[J].中国医学创新，2012，9（15）：127-128.
[14] 彭丽萍，李洋，李丹，等.利用痰诱导方法识别非嗜酸粒细胞性哮喘亚型[J].中国老年学杂志，2011，31（5）：746-748.
[15] 毛山，殷凯生.支气管哮喘患者痰中细胞因子水平的变化[J].临床肺科杂志，2013，18（10）：1772-1773.
（收稿日期：2013-12-30）
[关键词] 嗜酸粒细胞；支气管哮喘；诱导痰
[中图分类号] R562.25 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）05-70-03
支气管哮喘是临床上非常常见的呼吸道疾病，其以气道出现慢性炎症、气道高反应为主要特点[1]，常见的症状为发作性气急、喘息、咳嗽、胸闷等。支气管哮喘对患者产生巨大的影响，可导致活动、运动受限，甚者误学、误工，哮喘反复发作能够导致慢性阻塞性肺疾病的发生，破坏人体的健康，如果其急性发作救治不当更会致命，因此引起全球的广泛关注[2]。支气管哮喘是由多种细胞、细胞因子参与的变态反应，其中嗜酸性粒细胞（EOS）在急性发作
中起到最为主要的作用，诱导痰EOS能够监测支气管哮喘患者病情，为治疗提供指导。我院在支气管哮喘患者中采用诱导痰嗜酸粒细胞检查进行监测病情取得了较好的效果，现总结报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择我院2012～2013年呼吸科收治的90例支气管哮喘患者的资料，均符合2004年修订的哮喘诊断标准[3]，其中男46例，女44例，年龄22～46岁，平均（32.2±7.6）岁；所有患者经治疗后，根据哮喘控制测试及肺功能按全球哮喘防治倡议，均达到停药标准，同时患者行诱导痰嗜酸性粒细胞检查，
痰诱导检测诱导进行前10min患者吸入沙丁胺醇400?g；患者清水漱口、扪鼻后进行3%高渗盐水超声雾化吸入，时间以15min为宜，如果无痰咳出可以延长雾化的时间，一般不超过半小时，将痰咳出到培养皿内。选取足量痰标本置于EP管内，加入痰重量大于4倍体积的0.1%DTT；置于37℃水浴10min时间，漩涡振荡1～2次，300目滤网过滤谈混悬液后，3000转离心机离心10min，接着弃掉上清液，将沉淀物进行涂片，HE染色，封片，计算出各细胞的比例。根据患者嗜酸性粒细胞含量分为观察组（嗜酸性粒细胞>1%，50例）及对照组（嗜酸性粒细胞<1%，40例），两组患者性别组成、年龄差异等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法
对两组患者停药随访4周以后进行哮喘控制测试（ACT）[4]，测定第一秒用力呼气容量和呼出50%与75%肺活量时的最大呼气流量。
1.2.1 哮喘控制测试 回忆近4周的情况并回答包括呼吸急促、急救药物的使用、哮喘对生活与工作的影响、夜间觉醒、患者对哮喘控制的标化等对非控制哮喘进行预测的相关指标的问题，每一个问题均采用5分标尺法进行评估，从1～5分，分数越高哮喘控制越好，总分共25分：完全控制；20～24分：部分控制；<24分：未得到控制。哮喘控制达标率=（完全控制例数+部分控制例数）/总例数×100%。具体哮喘控制测试表见表1。
1.2.2 肺功能检测 采用Quark PFT4大型组合式肺功能仪常规方式检测，操作流程符合美国胸科协会（ATS）、欧洲呼吸协会（ERS）标准。检测指标有FEV1，PEF，FEF25%和FEF50%。FEV1/FVC不小于70%提示肺通气正常，FEF25%和FEF50%均小于正常预计值的80%说明小气道功能有异常[5]。
1.3 统计学处理
采用SPSS13.0统计软件进行数据处理，计量资料用（）表示，采用t检验，计数资料采用x2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组ACT测试结果比较（表2）
3 讨论
支气管哮喘简称哮喘，其是由多种因素所致的气道慢性变态反应性的炎症性疾病，从而使气道平滑肌收缩、痉挛[5]，所以主要的临床表现为反复发作的气急、喘息、咳嗽、胸闷等症状，其在临床上非常常见，全球约有3亿的患者，我国更是超过1500万[6]。哮喘病程很長，可达十几年甚至几十年，病程越长，气道重塑愈加明显，气道阻塞的可逆转性愈小[7]，这种在呼气相存在的通气功能障碍，导致肺泡内的气体发生滞留，肺泡在这种长期过度膨胀下弹性降低，最终发展成为慢性阻塞性肺疾病，甚至肺源性心脏病[8]，在给患者带来巨大痛苦的同时更成为患者家庭和社会的沉重经济负担，因此其得到了全球学者的普遍关注。
目前临床上主要通过症状、体征、支气管激发试验、肺功能、哮喘控制测试等中和情况来诊断支气管哮喘，并对其病情作出评估。其中肺功能检查在哮喘发作时，呼吸流速的相关指标均会显著下降[9-13]，如第一秒用力呼气量（FEV1）、FEV1占用力肺活量（FVC）比值（FEV1/FVC%）、呼出50%与75%肺活量时的最大呼气流量（MEF50%、MEF75%）等均会减小，同样在哮喘缓解期以上指标亦会好转。而哮喘控制测试（ACT）通过问卷的形式询问有关哮喘症状、生活质量的问题以进行综合判定，更可以作为肺功能检查的补充[10]。
但是许多的实验证明了哮喘的临床症状、肺功能的改变远远晚于实验室检查中的改变，同时大量支气管舒张药物的应用更可以掩盖气道中持续性的炎症，因此不能仅仅通过肺功能的好转、哮喘症状的控制作为判断气道炎症控制情况的标准[11]。 研究发现，哮喘气道炎症的实质就是各种炎性细胞的浸润以及细胞因子对气道壁的损伤，其中嗜酸性粒细胞（EOS）是最主要的炎细胞[14-15]，由于是在气道内局部的炎细胞浸润，其更较血液中的EOS更有敏感性。
本组研究中发现，在达到停药标准后进行诱导痰嗜酸性粒细胞检查仍发现EOS增高，更加证实了通过肺功能的好转、哮喘症状的控制作为判断气道炎症控制情况是不可行的，同时在随访4周后观察组肺功能指标FEV1/FVC为（0.82±0.04），FEF25%～75%为（77.2±9.6），ACT达标率为80.7%，对照组肺功能指标FEV1/FVC为（0.86±0.03），FEF25～75%为（90.0±10.16），ACT达标率为87.5%，亦证实了EOS是引起哮喘气道炎症的重要细胞。
综上所述，诱导痰嗜酸性粒细胞检查可作为支气管哮喘患者病情监测的重要指标，只有气道炎症得到有效控制，才能减少哮喘的再次发作，从而提高患者的生活质量。
[参考文献]
[1] 匡玉宝，黄英河.支气管哮喘患者治疗前后ECP和E0S对比分析[J].当代医学，2010，16（28）：98.
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[5] Rosi E，Ronchi MC，Grazzini M，et al.Sputum analysis，bronchial hyperresponsivness，and airway function in asthma：Results of a factor analysis[J].J allergy Clin Immunol，2011，103（31）：232-237.
[6] 孙艳菊，张三山，王林娥，等.H1阻滞剂鼻喷剂联用吸入激素对哮喘患者诱导痰嗜酸细胞及炎症因子的影响[J].中国现代医生，2012，50（20）；54-56，59.
[7] Lehmann S，Bakke PS，Eide GE，et al.Clinical data discrinfinating between adults with positive and negative results on bronchodilator testing[J].Int J Tuberc Lung Dis，2010，12（2）：205-213.
[8] 袁仕伟，郑卫东，吴宏杰.支气管哮喘急性发作期嗜酸细胞阳离子蛋白及炎症相关因子检测的临床意义[J].中国医药导报，2012，9（17）：26-27.
[9] Nonmra N，Yoshikawa T，Kamoi H，et al.Induced sputum analysis in asymptomatic young adults with bronchial hyperresponsiveness to methacholine[J].Respirology，2007，12（4）：516-522.
[10] 罗炜，王慧，陈如冲，梁健鹏.嗜酸粒细胞性支气管炎和哮喘患者诱导痰微量元素的变化及意义[J].检验医学与临床，2012，9（10）：1158-1159.
[11] 甘明，易運林，李小玲，等.支气管哮喘患者诱导痰EOSECP及血清IL一13水平检测及其意义[J].检验医学与临床，2012，9（5）：578-580.
[12] 孔炜，汪晓莺.支气管哮喘患者外周血白细胞介素19水平及其临床意义[J].南京医科大学学报（自然科学版），2007，27（5）：499-501.
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[14] 彭丽萍，李洋，李丹，等.利用痰诱导方法识别非嗜酸粒细胞性哮喘亚型[J].中国老年学杂志，2011，31（5）：746-748.
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（收稿日期：2013-12-30）