【摘 要】
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目的：利用大肠杆菌以非包涵体的形式表达中国两栖动物林蛙的细胞毒性核糖核酸酶,探索原核表达系统表达细胞毒性核糖核酸酶的条件。方法：利用中国林蛙核糖核酸酶基因及表达质粒p
【基金项目】
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北京市教育委员会科技发展计划面上项目(KM200411417014)资助
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目的：利用大肠杆菌以非包涵体的形式表达中国两栖动物林蛙的细胞毒性核糖核酸酶,探索原核表达系统表达细胞毒性核糖核酸酶的条件。方法：利用中国林蛙核糖核酸酶基因及表达质粒pFlag-CTS构建重组表达质粒,转导BL21后用IPTG诱导表达,观察不同诱导温度下细菌的生长情况。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法进行重组蛋白的检测。结果：通过观察不同诱导温度下细菌的生长情况,发现利用较低温度可以降低宿主细胞对表达产物细胞毒性的敏感性,成功地得到了这种目的基因的表达产物。结论：低温（20℃）可以有效表达目的蛋白。
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