【摘 要】
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目的克隆表达日本血吸虫钙蛋白酶（Sjcalpain），了解Sjcalpain在尾蚴内的分布及其在尾蚴侵染中的作用。方法根据SjCalpain基因全序列（GenBank登录号为AB016726）设计引物，PCR分别扩增S
【机 构】
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复旦大学生命科学学院微生物与微生物工程系,中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所
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目的克隆表达日本血吸虫钙蛋白酶（Sjcalpain），了解Sjcalpain在尾蚴内的分布及其在尾蚴侵染中的作用。方法根据SjCalpain基因全序列（GenBank登录号为AB016726）设计引物，PCR分别扩增Sjcalpain的催化位点区域和Ca“结合位点区域的基因片段，克隆入pET-28a原核表达载体，并在大肠埃希菌（Ecoli）BL21（DE3）中进行原核表达，组氨酸标签亲和层析法纯化表达产物。聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析蛋白表达和纯化情况。纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备兔多克
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