【摘 要】
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目的制备特异识别弓形虫沉默信号调节子2(TgSir2)多克隆抗体。方法以酵母Sir2氨基酸序列为模板,寻找弓形虫基因组中同源序列,并进行信号肽预测。以弓形虫RH株cDNA为模板,构建
【机 构】
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温州医科大学仁济学院,温州医科大学眼视光医学、生物医学工程学院,温州医科大学第二临床医学院,东阳市人民医院检验科,温州医科大学基础医学院,温州医科大学生命科学学院、检验医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(No.81702024);浙江省科技厅公益技术研究社会发展项目(No.2015C33129);浙江省大学生新苗人才计划项目(No.2017R413019、No.2017R413062)联合资助~~
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目的制备特异识别弓形虫沉默信号调节子2(TgSir2)多克隆抗体。方法以酵母Sir2氨基酸序列为模板,寻找弓形虫基因组中同源序列,并进行信号肽预测。以弓形虫RH株cDNA为模板,构建pET28b-TgSir2重组质粒,转化入大肠埃希菌(E.coli)BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,用镍柱亲和层析法纯化诱导表达产物,并以小鼠抗His标签单克隆抗体作为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)进行鉴定。以纯化的TgSir2蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔,获得特异性抗Tg
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