【摘 要】
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目的:构建具足够库容量的小鼠牙胚cDNA文库.方法: 先提取小鼠牙胚mRNA并反转录成cDNA,经LD PCR扩增后,将双链cDNA 克隆到λTripleX中,包装噬菌体,以XL-l blue为受菌体滴定、
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院口腔内科,710032上海第二医科大学口腔医学院;上海中国科学院细胞生物学研究所;
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目的:构建具足够库容量的小鼠牙胚cDNA文库.方法: 先提取小鼠牙胚mRNA并反转录成cDNA,经LD PCR扩增后,将双链cDNA 克隆到λTripleX中,包装噬菌体,以XL-l blue为受菌体滴定、扩增文库,用已知的牙胚基质蛋白基因引物作PCR鉴定文库.结果:500 μl文库的库容量为1 .3×106 pfu,重组率为72%,从文库中克隆到已知的5种牙胚基蛋白基因.结论:构建的文库具较好的库容量和重组率及较大的插入片段.
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