青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制初探

来源 :南京医科大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:hhtui
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目的:探讨青蒿素对人皮肤瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用及相关机制.方法:进行人瘢痕疙瘩成纤维细胞的原代分离、培养和传代.不同浓度青蒿素分别预处理人瘢痕疙瘩成纤维细胞,每隔24h用CCK-8法测定细胞增殖情况,连续测定5d,观察药物处理的最佳浓度.后续实验分为空白组、青蒿素组、青蒿素+IL-6组、青蒿素+AG490组,流式细胞术检测各组早期细胞凋亡率,real-time FCR法检测各组基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)2、MMP9、STAT3 mRNA的表达水平,Western blot法检测各组MMP2、MMP9、STAT3、p-STAT3蛋白的表达水平.结果:根据CCK-8实验结果选择150 μg/mL青蒿素作用48h的细胞为后续实验干预浓度和时间.流式细胞术结果显示,青蒿素组、青蒿素+IL-6组、青蒿素+AG490组早期凋亡细胞百分比明显高于空白组,青蒿素+IL-6组的早期凋亡细胞百分比低于青蒿素组和青蒿素+AG490组(P<0.01).real-time PCR 检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL-6组、青蒿素+AG490组中MMP2、MMP9 mRNA的表达均显著降低(P<0.01);MMF2、MMP9 mRNA在青蒿素组、青蒿素+AG490组的表达较青蒿素+IL-6组显著降低(P<0.01).Western blot检测结果显示,与空白组比较,青蒿素组、青蒿素+IL-6组、青蒿素+AG490组中STAT3、p-STAT3、MMP2、MMP9蛋白的表达均明显降低(P<0.01),p-STAT3、MMP2、MMP9蛋白在青蒿素组、青蒿素+AG490组中的表达低于在青蒿素+IL-6组中的表达(P<0.01).结论:青蒿素对瘢痕疙瘩起抑制作用,其机制可能通过抑制p-STAT3的过度激活来抑制MMP2、MMP9的表达.
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