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基于健康烟草根际土壤，分离筛选具功能多样化、活性高的菌株，为作物病害生物防治提供高效、多样化的生防资源。采用平板对峙法筛选活性高、抑菌谱广的菌株，测定菌株对番茄枯萎病病菌的抑制率、对菌丝生长及和孢子萌发率的影响；应用PCR技术，检测菌株抗生素合成基因，结合室内盆栽实验检测功能菌株对番茄枯萎病的防治效果，并测定其体外产酶、解磷、解钾、固氮及产铁载体能力；结合形态学、生理生化和16S rDNA通用引物对功能菌株进行鉴定；于健康烟草根际土壤分离得127个菌株，24株对番茄枯萎病病菌等指示病原菌具有抑制作用，活性较高的3个菌株：SH-1471、SH-1464、SH-1439对番茄枯萎病菌抑制率分别为82.0%、74.0%、75.0%；可使番茄枯萎病菌菌丝扭曲变形，形成泡囊结构，对番茄枯萎病菌孢子萌发抑制率分别为62.7%、50.0%、37.0%；经测定，3个功能菌株具有产srfA、fenB、ituA、ituD、bymA等抗生素合成基因；盆栽实验结果表明SH-1471对番茄枯萎病的防效为83.7%,SH-1464对番茄枯萎病的防效为60.7%,SH-1439对番茄枯萎病的防效为59.0%；此外，3个菌株均具有产蛋白酶、纤维素酶、解磷、固氮、分泌铁载体的能力。经鉴定，SH-1471为贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）（Gen-bank ON417363）、SH-1464为拟蕈状芽孢杆菌（Bacillus paramycoides）（Gen-bank ON417365）、SH-1439为暹罗芽胞杆菌（Bacillus siamensis）（Gen-bank ON417364）；菌株SH-1471、SH-1464、SH-1439具有高效、广谱的抑菌能力，且功能多样化，可作为多种病害的高效生防资源，具有极大的开发潜力。