特异性抑制乏氧诱导因子-1α表达的siRNA筛选

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筛选有效抑制乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的小干扰RNA(siRNA)序列,并观察其对细胞中HIF-1α表达的抑制作用。设计针对HIF-1α的6对(siRNA1217,siRNA1612,siRNA2258,siRNA2752,siRNA3724,siRNA3168)及一条阴性对照siRNA(称为NC)。在Lipofectamine 2 000介导下转染人鼻咽癌细胞系CNE2。同时采用RT-PCR法和Western blot方法检测细胞中HIF-1α含量,以β-actin蛋白做内参照。结果:Lipofectamin 2 000在2μL转染40 pmol/L时,能实现最大转染效果。与其他各组相比,转染了siRNA3724,siRNA3168基因序列的人鼻咽癌细胞中,编码HIF-1αmRNA的含量明显减少。成功设计了针对HIF-1α的siRNA,并从中筛选出HIF-1αsiRNA1612,siRNA3724,siRNA3168能够有效抑制人鼻咽癌表达,为肿瘤的放射治疗及其临床应用奠定了基础。
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