麦角甾苷对大鼠骨髓基质细胞增殖和成骨分化的影响研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanghaocong
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目的研究麦角甾苷对大鼠骨髓基质细胞增殖和成骨分化的影响及机制。方法密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓基质细胞并鉴定,细胞随机分为高、中、低浓度实验组和对照组,分别用100,50,25和0μmol·L-1的麦角甾苷干预培养。培养24,4,72 h后,用细胞计数法(CCK-8)检测细胞增殖情况。培养24,48,96 h后进行碱性磷酸酶活性检测,72 h后进行碱性磷酸酶染色。以蛋白质印迹法(Western blot)及实时聚合酶链式反应(Real time PCR)分别检测成骨相关蛋白及基因表达情况。结果培养72 h后,高剂量实验组骨髓基质细胞增殖能力为1.22±0.05,低于对照组的1.50±0.09,差异有统计学意义(P<0.05)。培养24,48,96 h后,高、中、低浓度实验组碱性磷酸酶表达量较对照组增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养72 h后,碱性磷酸酶染色结果显示,高、中、低浓度实验组培养皿颜色均深于对照组。Western blot检测结果显示,高、中、低浓度实验组骨形态发生蛋白2(BMP2)、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osterix蛋白表达水平均高于对照组(P<0.05),而各剂量实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。Real time PCR检测结果显示,高、中、低浓度实验组BMP2、Smad1、Smad5、Smad8、Runx2、Osterix基因表达均高于对照组(P<0.05),而各浓度实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论麦角甾苷对体外培养的大鼠骨髓基质细胞增殖并无显著影响,并可以通过BMP2-Smads-Runx2-Osterix通路促进BMSCs成骨分化。
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