用小鼠摄金蛋白启动子在中国地鼠卵巢细胞中表达HBsAg及影响因素的研究

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:panzx777
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本文报告用小鼠摄金蛋白-1(mMT-1)启动子构建了乙肝病毒(HBV)S基因的重组质粒。该质粒中同时组装了SV40启动子及其控制下的小鼠二氢叶酸还原酶基因(dhfr)的cDNA片段。用磷酸钙沉淀法将表达载体DNA导入CHO-dhfr-细胞,获得表达。克隆表达的阳性率为88%。氨甲喋呤(MTX)可使克隆H4细胞系HBsAg的表达量提高1倍。经打点杂交检测表明在MTX的压力下,S基因随着dhfr基因的扩增而扩增。H4克隆细胞系表达HBsAg受重金属铜和锌的诱导。用5-氮胞苷去甲基化后,可使H4细胞HBsAg的表达量略有提高。在5-氮胞苷协同下,MTX的扩增效率为365%。小鼠摄金蛋白启动子未因甲基化而失去启动子功能。

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