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目的 利用猪耳廓软骨细胞制备软骨细胞膜片,与3D打印聚酰胺带孔管状支架结合,构建管状软骨组织,用于气管软骨的缺损重建。方法 用酶消化法分离获得原代猪耳廓软骨细胞,以5×105cells/m L的密度将第2代软骨细胞接种于6 cm细胞培养皿上,在软骨细胞膜片培养环境中培养约14 d,获得完整软骨细胞膜片;4层软骨细胞膜片依次卷叠于3D打印的聚酰胺(PA12)带孔管状内支架上,以构建管状软骨组织复合物;体外静态培养12周或裸鼠皮下培养8周,对形成的管状软骨组织行大体观察及石蜡切片组织学染色鉴定。结果