【摘 要】
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为更好地检测和防控猪圆环病毒2型(PCV2),利用bac PAK杆状病毒系统高效表达了PCV2 CAP蛋白。应用PCR扩增PCV2 ORF2基因,并将其克隆到载体pbac PAK9中,获得重组载体pbac PAK9-
【机 构】
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北京世纪元亨动物防疫技术有限公司; 中国动物疫病预防控制中心;
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为更好地检测和防控猪圆环病毒2型(PCV2),利用bac PAK杆状病毒系统高效表达了PCV2 CAP蛋白。应用PCR扩增PCV2 ORF2基因,并将其克隆到载体pbac PAK9中,获得重组载体pbac PAK9-ORF2。用脂质体介导法将其与线性化杆状病毒bac PAK6共转染于Sf21细胞中,经蚀斑纯化获得纯的重组杆状病毒,并于优化表达条件后获得CAP蛋白。SDS-PAGE分析表明,CAP蛋白分子质量约为28 ku,表达量约为33 mg/L;间接ELISA试验表明,CAP蛋白与PCV2阳性血清产生特异性免疫反应,具有良好的反应原性。上述结果表明,本研究用杆状病毒系统高效表达了PCV2 CAP蛋白,为PCV2的分子诊断及亚单位疫苗的研制奠定了基础。
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