抑制细胞骨架改建对流体剪切应力下成骨细胞胞外信号调节激酶激活的影响

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目的 探讨RNA干扰抑制细胞骨架改建对流体剪切应力(fluid shear stress,FSS)下原代成骨细胞胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK1/2)激活的影响.方法 酶消化法原代培养BALB/c小鼠成骨细胞,分别进行RNA干扰(干扰+加载组)和阴性RNA干扰(单纯加载组),并加载0、5、15、30、60 min 1.2 Pa的FSS,检测胞质中磷酸化ERK1/2(phosphorylationERKI/2,P-ERK)和ERK1/2的变化情况,并对结果进行组间双因素方差分析和组内单因素方差分析.结果 单纯加载组加载0、5、15、30、60 min FSS后成骨细胞P-ERK/ERK比值差异有统计学意义(分别为0.047±0.031、0.253±0.137、0.390±0.155、0.613±0.123、0.680±0.108)(P<0.01).对P-ERK/ERK比值而言,RNA干扰因素与FSS加载因素间存在交互效应(P<0.01).干扰+加载组FSS作用5和15 min时,P-ERK/ERK比值(分别为0.623±0.129和0.623±0.064),与0 min (0.440±0.032)差异有统计学意义(P<0.05);加载30 min时P-ERK/ERK比值(0.333±0.086)降到基线水平;加载60 min时,P-ERK/ERK比值(0.667±0.064)再次显著升高并达高峰,与0 min差异有统计学意义(P<0.01).结论 FSS可快速激活原代成骨细胞ERK1/2途径;RNA干扰抑制细胞骨架改建可加速FSS介导的ERK1/2途径的激活,从而提高成骨细胞ERK1/2对FSS的敏感性。

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