猪PBD—1稳定转染细胞系的建立

来源 :湖北畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:griffinroar
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目的:构建稳定表达猪PBD—1的转基因细胞系,为稳定生产猪PBD—1并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。方法:真核表达载体DIRES2-EGFP—PBD-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体介导法转染marc-145细胞.通过不同浓度的G418加压筛选,和进一步采用单个克隆法筛选,建立稳定转染的marc-145细胞系.用RT-PCR及抑茵试验检测PBD—1的表达。结果:建立了稳定转染的marc-145细胞系.成功地表达目的基因.其培养上清液及细胞冻融液具有抑茵作用。结论:利用真核表达载体pIRES2-EG
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