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摘 要：近几年，受诸多因素的影響，水细菌滋生，致使人类的生活饮用水遭到污染。据相关研究人员证明，多种病危生物的主要传播媒介之一是生活饮用水。因此，对于生活饮用水中细菌的检测工作，已逐渐引起国家及社会各界人士的关注。此外，国民对于水资源的相关检测部门的检测技术提出了更高的要求。细菌总数，水资源清洁度的关键性指标，宏基因组技术的应用，利于对水资源中的细菌进行快速检测。本文先是对宏基因组技术在自来水检测中应用的意义进行了简述，后又对该技术需要的材料及操作方法展开了深度探究，此次探究的主要目的是为了加强相关技术的应用，进而为我国水资源的检测工作提供帮助。
关键词：宏基因组技术；国标法；水质检测
中图分类号：R123.1 文献标识码：A 文章编号：1004-7344（2018）18-0337-02
前 言
水资源，万物生存与发展的关键性资源。在人类的生活中，水资源具有重要的作用。在众多的资源当中，生活饮用水是人类生活中不可或缺的资源之一。目前，我国的饮用水主要来源于自来水，而在自来水环境中，是细菌最容易滋生的地方。文章依据宏基因组技术对自来水中细菌检测的重要性，进一步对该技术的操作方式及所需要的相关材料进行了分析，总结出了相应的结果及讨论，对宏碁因组技术的应用与推广具有理论性意义，对我国水资源的细菌检测工作具有现实性的指导意义。
1 宏基因组技术在自来水检测中应用的意义
生活中，大多数微生物传播的主要途径是生活饮用水。对生活饮用水微生物的检测是监测生活饮用水质量的重要方式和手段，细菌总数检测生活饮用水清洁度检测的重要指标。生活应用水主要是通过水泵站汲取地表水、地下水，由自来水厂根据国家饮用水的标准，进行沉淀、消毒、过滤等工序处理后，通过配置水泵站供给用户。
目国标上对微生物总数的测定方法主要是用固体营养琼脂在36℃的环境中，培养48h后，对微生物菌落进行计算。按照国标惯用的方法，菌落的培养以及计算需要在相对无菌的环境中，并且需要在48h后，才能得到检测的效果。同时，加上厌氧菌和兼性厌氧菌生长较为缓慢，使得检测的结果误差较大，尤其是将样品稀释高倍数后进行的检测。本文采用红基因组技术的，采用基因组结合滤膜过滤收集抽提试剂盒的方法，来对自来水中的细菌中的基因组进行提出。通过对自来水中的细菌总数进行检测，细菌数量越多，基因组的含量也越高，是成正比的关系。这种方法或许可以代替传统自来水细菌总数检测的方法。
2 材料与方法
2.1 样品来源
自来水样品来源土默特左旗，土默特左旗位于内蒙古自治区呼和浩特市。
2.2 方 法
2.2.1 国标细菌总数检测的方法
国标检测的方法，是检测每毫升子阿里水中含有的细菌菌落总数，并进行三次做重复的检测，在进行检测实验时，将样品原液及样品稀释到10-1、10-2三组进行检测实验。同时在进行两组平行实验，取平均的结果。
2.2.2 计算国标法试验样品的体积
国标法进行检测的样品体积通常为1L，将1L100CFU/mL的自来水则算成本次细菌菌落总数检测实验的样品体积，分别提出限值体积、大于该体积以及小于该体积的自来水样品中细菌的总基因。
2.2.3 国标法细菌总基因提出的方法
国标法在进行细菌总基因提出的方法：①通过直径为0.22um的醋酸纤维过滤膜在真空的环境中，抽滤收集微生物，并用冲洗、洁净的尖头镊子吧过滤膜去下。②通过细菌菌落总数基因组提取试剂盒，从而过滤膜上细菌菌落总数基因组。将过滤膜中防止在20ml的无菌离心管中，并确保双体积试剂加入到每一个步骤中，并且在过滤膜取出弃掉后，才能加入无水乙醇。
2.2.4 电泳分析宏基因组
对提取出的细菌落总基因的进行琼脂糖凝胶电泳，琼脂糖凝胶为1%，80V，65mA，30min，上样量均为10ul。并且，需要在紫外凝胶成像仪现，对电泳的结果进行拍照分析。在这个限制总基因组主条带和总基因主条带的亮度比值需啊哟通过lmageJ图像分析如软件进行分析。最后，剩余的水样总基因组应保存在零下20℃的环境中，为后续验证提供样品。
2.2.5 实际样品检测
与2015年7月在内蒙古自治区呼和浩特市土默特左旗采集自来水样品，并使用国标法和宏基因组的方法进行进行检测，为验证新方法的可信度。二次检测的参考值采用的之前保存的国标限值水样基因组，进行检测自来水样品体积为1L，水样做三组平行实验，并取均值。
3 结果与讨论
3.1 结 果
3.1.1 国标限值体积的确定结果
本次实验检测中，国标法检测下，最终确定样品中的菌落总数为（165±5）CFU/ml。按照GB/t5750.12-2006的规定限制在100CFU折算，则1L的自来水样品相当于本次检测样品的600ml中汉以后的细菌菌落总数。
3.1.2 不同体积样品基因组提出结果分析
本次检测分别在6、8、10进行取水实验，提出水样体积分别为500ml、600ml、700ml以及1l自来水细菌菌落总基因组。通过进行1%的琼脂糖凝胶电泳，得出电泳条带清晰，如图1所示。
3.1.3 实际水样检测结果
三组自来水样品细菌菌落总基因组的条带亮度与国标限值菌落总基因组的亮度相比，比值为别为2.5、2.08和2.17，取三组平均值。国标法检测的结果为（168±50）CFU/ml，与宏基因组技术的检测结果一直，由此得出，新采集的自来水样品微生物超标。
3.2 讨 论
本文对某小区生活饮用水的检测结果不容乐观，由于饮用水中含有大量的微生物，使得人容易被感染，造成肠道疾病。因此，加强公共场所生活饮用水标准进行检测势在必行。国标检测法检测获得的结果是在48h之后，在这48h内，可能微生物的感染已经发生，并不能实施反映水中的水质情况。因此，继续采用新的检测方法。本实验运用宏基因组检测技术，对水质进行检测，检测的时间不会超过2h，与国标法相比，检测的时间大大缩短，能够及时的反映水质情况，为预防饮用水卫生时间起到积极的作用。
4 结束语
综上所述，本文对某小区生活饮用水的检测结果不容乐观，由于饮用水中含有大量的微生物，使得人容易被感染，造成肠道疾病。因此，加强公共场所生活饮用水标准进行检测势在必行。国标检测法检测获得的结果是在48h之后，在这48h内，可能微生物的感染已经发生，并不能实施反映水中的水质情况。因此，继续采用新的检测方法。本实验运用宏基因组检测技术，对水质进行检测，检测的时间不会超过2h，与国标法相比，检测的时间大大缩短，能够及时的反映水质情况，为预防饮用水卫生时间起到积极的作用。
参考文献
[1]燕平梅，荆雪娇，李艳琴，等.基于宏基因组学技术分析“泡菜老汤”发酵甘蓝原核微生物群落结构[J].食品工业科技，2018，01（02）：119～123.
[2]唐乐丽，王晓萌，吴秀玲，等.宏基因组文库新型β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及酶学性质分析[J].食品科学，2018，01（04）：118～124.
收稿日期：2018-5-23
关键词：宏基因组技术；国标法；水质检测
中图分类号：R123.1 文献标识码：A 文章编号：1004-7344（2018）18-0337-02
前 言
水资源，万物生存与发展的关键性资源。在人类的生活中，水资源具有重要的作用。在众多的资源当中，生活饮用水是人类生活中不可或缺的资源之一。目前，我国的饮用水主要来源于自来水，而在自来水环境中，是细菌最容易滋生的地方。文章依据宏基因组技术对自来水中细菌检测的重要性，进一步对该技术的操作方式及所需要的相关材料进行了分析，总结出了相应的结果及讨论，对宏碁因组技术的应用与推广具有理论性意义，对我国水资源的细菌检测工作具有现实性的指导意义。
1 宏基因组技术在自来水检测中应用的意义
生活中，大多数微生物传播的主要途径是生活饮用水。对生活饮用水微生物的检测是监测生活饮用水质量的重要方式和手段，细菌总数检测生活饮用水清洁度检测的重要指标。生活应用水主要是通过水泵站汲取地表水、地下水，由自来水厂根据国家饮用水的标准，进行沉淀、消毒、过滤等工序处理后，通过配置水泵站供给用户。
目国标上对微生物总数的测定方法主要是用固体营养琼脂在36℃的环境中，培养48h后，对微生物菌落进行计算。按照国标惯用的方法，菌落的培养以及计算需要在相对无菌的环境中，并且需要在48h后，才能得到检测的效果。同时，加上厌氧菌和兼性厌氧菌生长较为缓慢，使得检测的结果误差较大，尤其是将样品稀释高倍数后进行的检测。本文采用红基因组技术的，采用基因组结合滤膜过滤收集抽提试剂盒的方法，来对自来水中的细菌中的基因组进行提出。通过对自来水中的细菌总数进行检测，细菌数量越多，基因组的含量也越高，是成正比的关系。这种方法或许可以代替传统自来水细菌总数检测的方法。
2 材料与方法
2.1 样品来源
自来水样品来源土默特左旗，土默特左旗位于内蒙古自治区呼和浩特市。
2.2 方 法
2.2.1 国标细菌总数检测的方法
国标检测的方法，是检测每毫升子阿里水中含有的细菌菌落总数，并进行三次做重复的检测，在进行检测实验时，将样品原液及样品稀释到10-1、10-2三组进行检测实验。同时在进行两组平行实验，取平均的结果。
2.2.2 计算国标法试验样品的体积
国标法进行检测的样品体积通常为1L，将1L100CFU/mL的自来水则算成本次细菌菌落总数检测实验的样品体积，分别提出限值体积、大于该体积以及小于该体积的自来水样品中细菌的总基因。
2.2.3 国标法细菌总基因提出的方法
国标法在进行细菌总基因提出的方法：①通过直径为0.22um的醋酸纤维过滤膜在真空的环境中，抽滤收集微生物，并用冲洗、洁净的尖头镊子吧过滤膜去下。②通过细菌菌落总数基因组提取试剂盒，从而过滤膜上细菌菌落总数基因组。将过滤膜中防止在20ml的无菌离心管中，并确保双体积试剂加入到每一个步骤中，并且在过滤膜取出弃掉后，才能加入无水乙醇。
2.2.4 电泳分析宏基因组
对提取出的细菌落总基因的进行琼脂糖凝胶电泳，琼脂糖凝胶为1%，80V，65mA，30min，上样量均为10ul。并且，需要在紫外凝胶成像仪现，对电泳的结果进行拍照分析。在这个限制总基因组主条带和总基因主条带的亮度比值需啊哟通过lmageJ图像分析如软件进行分析。最后，剩余的水样总基因组应保存在零下20℃的环境中，为后续验证提供样品。
2.2.5 实际样品检测
与2015年7月在内蒙古自治区呼和浩特市土默特左旗采集自来水样品，并使用国标法和宏基因组的方法进行进行检测，为验证新方法的可信度。二次检测的参考值采用的之前保存的国标限值水样基因组，进行检测自来水样品体积为1L，水样做三组平行实验，并取均值。
3 结果与讨论
3.1 结 果
3.1.1 国标限值体积的确定结果
本次实验检测中，国标法检测下，最终确定样品中的菌落总数为（165±5）CFU/ml。按照GB/t5750.12-2006的规定限制在100CFU折算，则1L的自来水样品相当于本次检测样品的600ml中汉以后的细菌菌落总数。
3.1.2 不同体积样品基因组提出结果分析
本次检测分别在6、8、10进行取水实验，提出水样体积分别为500ml、600ml、700ml以及1l自来水细菌菌落总基因组。通过进行1%的琼脂糖凝胶电泳，得出电泳条带清晰，如图1所示。
3.1.3 实际水样检测结果
三组自来水样品细菌菌落总基因组的条带亮度与国标限值菌落总基因组的亮度相比，比值为别为2.5、2.08和2.17，取三组平均值。国标法检测的结果为（168±50）CFU/ml，与宏基因组技术的检测结果一直，由此得出，新采集的自来水样品微生物超标。
3.2 讨 论
本文对某小区生活饮用水的检测结果不容乐观，由于饮用水中含有大量的微生物，使得人容易被感染，造成肠道疾病。因此，加强公共场所生活饮用水标准进行检测势在必行。国标检测法检测获得的结果是在48h之后，在这48h内，可能微生物的感染已经发生，并不能实施反映水中的水质情况。因此，继续采用新的检测方法。本实验运用宏基因组检测技术，对水质进行检测，检测的时间不会超过2h，与国标法相比，检测的时间大大缩短，能够及时的反映水质情况，为预防饮用水卫生时间起到积极的作用。
4 结束语
综上所述，本文对某小区生活饮用水的检测结果不容乐观，由于饮用水中含有大量的微生物，使得人容易被感染，造成肠道疾病。因此，加强公共场所生活饮用水标准进行检测势在必行。国标检测法检测获得的结果是在48h之后，在这48h内，可能微生物的感染已经发生，并不能实施反映水中的水质情况。因此，继续采用新的检测方法。本实验运用宏基因组检测技术，对水质进行检测，检测的时间不会超过2h，与国标法相比，检测的时间大大缩短，能够及时的反映水质情况，为预防饮用水卫生时间起到积极的作用。
参考文献
[1]燕平梅，荆雪娇，李艳琴，等.基于宏基因组学技术分析“泡菜老汤”发酵甘蓝原核微生物群落结构[J].食品工业科技，2018，01（02）：119～123.
[2]唐乐丽，王晓萌，吴秀玲，等.宏基因组文库新型β-葡萄糖苷酶的筛选、克隆及酶学性质分析[J].食品科学，2018，01（04）：118～124.
收稿日期：2018-5-23