自稳定硫代磷酸寡核苷酸的合成及其在血液中的稳定性

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bobo20092009
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目的:探讨自行设计的自稳定硫代磷酸寡核苷酸在血液中的稳定性。方法:在DNA自动合成仪上合成硫代磷酸寡核苷酸和普通磷酸二酯键寡核苷酸,经高效液相仪纯化和32P标记后,两者一起在20%血清中37℃温育0,1,4,8及32h,酚抽提后,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较两者的降解率。结果:自稳定硫代磷酸寡核苷酸在各时相点均为完整形式,普通磷酸二酯键寡核苷酸在以上5个时相点的降解率分别为0.0%,77.2%,83.0%,84.4%和85.3%。结论:自稳定硫代磷酸寡核苷酸在血液中有较强的稳定性。 Objective: To investigate the self-designed stability of phosphorothioate oligonucleotides in blood. METHODS: Phosphorothioate oligonucleotides and normal phosphodiester oligonucleotides were synthesized on an automated DNA synthesizer and purified by high performance liquid chromatography and labeled with 32P, both incubated in 20% serum at 37 ° C 0, 1, 4, 8 and 32h, phenol extraction, denaturing polyacrylamide gel electrophoresis, the degradation rate of both. Results: The self-stabilized phosphorothioate oligonucleotides were intact at each time point. The degradation rates of ordinary phosphodiester oligonucleotides at the above five time points were 0.0%, 77.2 %, 83.0%, 84.4% and 85.3%. Conclusion: Self-stabilized phosphorothioate oligonucleotides have strong stability in the blood.
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