【摘 要】
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目的 观察愈风宁心滴丸对硝酸甘油诱导的偏头痛小鼠的影响,探索愈风宁心滴丸预防性治疗血管痉挛性偏头痛的作用及机制.方法 采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激BV2神经小胶质细胞,以愈风宁心滴丸(10、50、100 μmol/L)及葛根素(50 μmol/L)进行干预,收集细胞.将野生型C57BL/6J小鼠随机分成照组、模型组以及愈风宁心滴丸低、中、高剂量(200、360、600 mg/kg)组和葛根素组(37.8 mg/kg),给予药物进行干预,于第3、5、7、9、11天ip硝酸甘
【机 构】
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浙江尖峰药业有限公司,浙江金华321000;合肥工业大学,安徽合肥230001
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目的 观察愈风宁心滴丸对硝酸甘油诱导的偏头痛小鼠的影响,探索愈风宁心滴丸预防性治疗血管痉挛性偏头痛的作用及机制.方法 采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激BV2神经小胶质细胞,以愈风宁心滴丸(10、50、100 μmol/L)及葛根素(50 μmol/L)进行干预,收集细胞.将野生型C57BL/6J小鼠随机分成照组、模型组以及愈风宁心滴丸低、中、高剂量(200、360、600 mg/kg)组和葛根素组(37.8 mg/kg),给予药物进行干预,于第3、5、7、9、11天ip硝酸甘油溶液(10 mg/kg)建立小鼠偏头痛模型,第3天开始进行痛觉敏感(机械压痛和热敏耐受)行为学实验;实验结束后,取小鼠血清和脑组织.检测各组BV2细胞活性氧含量;采用Western blotting法检测各组细胞超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)、SOD2蛋白表达以及各组小鼠三叉神经脊束尾核(trigeminal nucleus caudalis,TNC)区降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、c-Fos、磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinases,p-ERK)及促炎细胞因子白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)蛋白表达;采用qRT-PCR法检测各组细胞SOD1、SOD2、IL-1β、肿瘤坏死因子-α[(tumor necrosis factor-α,TNF-α)mRNA表达以及小鼠TNC区IL-1β、TNF-α mRNA表达;采用免疫荧光检测各组小鼠TNC区CGRP、c-Fos表达;采用生化分析仪检测各组小鼠血清中丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性.结果 愈风宁心滴丸显著上调BV2细胞抗氧化酶SOD1、SOD2 mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05、0.01、0.001),降低活性氧水平(P＜0.01、0.001),抑制炎症因子IL-1β和TNF-α rnRNA表达(P＜0.001).与对照组相比,模型组小鼠基础痛阈值显著降低(P＜0.05、0.001),TNC区中CGRP、c-Fos、p-ERK蛋白表达水平显著升高(P＜0.01、0.001),TNC区IL-1β、TNF-α mRNA和IL-6蛋白表达水平显著升高(P＜0.01);与模型组相比,各给药组小鼠基础痛阈值显著升高(P＜0.05、0.01、0.001),TNC区中CGRP、c-Fos、p-ERK蛋白表达水平显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),TNC区IL-1β、TNF-α mRNA和IL-6蛋白表达水平显著降低(P＜0.05、0.01、0.001),且呈剂量相关性;愈风宁心滴丸对偏头痛小鼠血清中ALT、AST和ALP活性无显著性影响.结论 愈风宁心滴丸可能通过抑制血管扩张、抑制炎症反应、促进抗氧化酶表达等多重途径发挥预防性治疗血管痉挛性偏头痛的作用.
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