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目的:研究肝豆汤对高铜诱导的人神经母细胞瘤（SH-SY5Y）细胞自噬效应的影响及其作用机制,为中医药防治脑型Wilson病（Wilson disease,WD）提供新的治疗靶点和研究思路。方法:噻唑蓝（MTT）比色法筛选硫酸铜（CuSO4）造模浓度（0,100,200,400,800,1 600μmol·L-1）及时间; MTT比色法筛选含药血清浓度（5%,10%,15%,20%）及时间;乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测细胞LDH漏出率;流式细胞法检测细胞内活性氧（ROS）的含量;荧光染料JC-1检测细胞线粒体膜电位;流式细胞仪对自噬进行定量分析。蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝激酶B1（LKB1）,腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）,自噬微管相关蛋白轻链3A/B（LC3A/B）,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）,unc-51样激酶1（ULK1）,磷酸化ULK（p-ULK）,磷酸化AMPK（p-AMPK）蛋白的表达。结果:MTT结果显示,CuSO4对细胞的损伤呈现一定的量效和时效关系（P <0. 01）,随着CuSO4作用浓度及时间的增加,细胞存活率呈现下降趋势; 10%含肝豆汤兔血清可显著抑制CuSO4诱导的细胞死亡（P <0. 01）。LDH释放实验显示,与正常组比较,CuSO4作用细胞后LDH漏出率显著增加（P <0. 01）,与模型组比较,含肝豆汤兔血清明显降低CuSO4损伤细胞的LDH漏出率（P <0. 05）。DCFH-DA荧光染色显示,与正常组比较,CuSO4可显著增加细胞内ROS生成（P <0. 01）,与模型组比较,含肝豆汤兔血清可显著抑制CuSO4诱导的细胞内ROS产生（P <0. 01）。JC-1染色结果显示,与正常组比较,CuSO4诱导细胞线粒体膜电位Δψm显著降低（P <0. 01）,与模型组比较,含肝豆汤兔血清明显抑制CuSO4诱导的线粒体膜电位降低Δψm（P <0. 05）。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组细胞内LKB1,AMPK,LC3A/B,ULK1及p-AMPK蛋白的表达显著增加,mTOR及p-ULK蛋白的表达显著降低（P <0. 01）。与模型组比较,含肝豆汤兔血清组LKB1,AMPK,LC3A/B,ULK1及p-AMPK蛋白表达显著降低,mTOR及p-ULK蛋白表达显著增加（P <0. 01）。结论:高铜可通过诱导细胞内线粒体氧化应激,上调自噬相关蛋白LKB1,p-AMPK,AMPK,LC3A/B及ULK1的表达,下调自噬相关蛋白mTOR及p-ULK的表达,导致细胞发生自噬性死亡,而肝豆汤可通过调控LKB1/AMPK信号通路,下调自噬相关蛋白LKB1,p-AMPK,LC3A/B,ULK及AMPK的表达,上调自噬相关蛋白及基因mTOR及p-ULK的表达,抑制自噬的发生,阻断高铜诱导的神经元损伤,从而发挥神经保护作用。