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摘 要 选用3种核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫进行室内毒力测定。结果表明，3种核型多角体病毒浸卵处理对2种夜蛾的卵孵化无明显影响，孵化率均≥91.67%;对浸卵处理后的初孵幼虫的校正死亡率都较高，说明3种核型多角体病毒对两种夜蛾科的2龄幼虫均表现出较强的毒性。
关键词 核型多角体病毒;斜纹夜蛾;棉铃虫
中图分类号：S481.1 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.06.003
斜纹夜蛾（Spodoptera litura）、棉铃虫（Helicoverpa armigera）均为鳞翅目夜蛾科昆虫，幼虫食性复杂，取食量大，寄主植物分布广泛[1-2]。烟草是我国重要的经济作物，其收获物为叶片，夜蛾类幼虫为害烟叶后造成叶片缺刻、破损，甚至将整张叶片完全取食光，严重影响烟草产量和质量，给烟农带来直接经济损失。核型多角体病毒属杆状病毒科核型多角体病毒属，对农林害虫的侵染专一化程度较高，且对天敌、环境、人畜无害，国内外在分离鉴定、毒力测定、致病机理、病毒制剂及田间应用等方面开展了大量研究[3-8]。基于此，研究3种夜蛾科核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫的室内毒力，旨在进一步明确核型多角体病毒杀虫剂对烟草主要害虫的作用机制，拓展夜蛾类新的生物防治措施，为科学、绿色防控烟草害虫提供参考和依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试昆虫
斜纹夜蛾、棉铃虫卵均采自长沙市烟草公司浏阳烟田，饲养条件为（26±1）℃，相对湿度70%±5%，光照（L）∶暗光（D）周期为12 h∶12 h，饲料为新鲜烟叶，于实验室饲养5代以上供试。
1.1.2 供试烟草
品种为云烟87，烟草种植过程中未施用任何农药。
1.1.3 供试药剂
斜纹夜蛾核型多角体病毒SpliNPV郴州株，湖南郴州烟区分离，保存于长沙市烟草公司实验室，
10亿PIB/mL;200亿PIB/mL斜纹夜蛾核型多角体病毒（水分散粒剂）、50亿PIB/mL棉铃虫核型多角体病毒（悬浮剂）均购自科云生物。
1.2 试验方法
1.2.1 核型多角体病毒对2种夜蛾卵的毒力试验
将新鲜饱满的初产卵分别放在浓度为2.0×107 PIBs·mL-1
的供试药剂溶液中浸渍10 s后用吸水纸将多余的药液吸干，室温晾干后，将卵刷到培养皿中，并置于温度（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光周期L∶D=12 h∶12 h
的人工气候箱中培养，记录卵的孵化情况，以清水为对照，每处理30粒卵，重复4次，共120粒卵。孵化出来的幼虫及时挑出转移至透明饲养盒，用新鲜烟叶喂饲，记录幼虫死亡情况，直至幼虫进入3龄期。
1.2.2 核型多角体病毒对2种夜蛾2龄幼虫的毒力试验
将烟草叶片剪成4 cm×4 cm大小的正方形，分别放在浓度为2.0×107 PIBs·mL-1的供试药剂溶液中浸渍10 s于室温下晾干后置于塑料盒中，挑选同批孵化的大小一致的2龄初期幼虫于烟叶上，每盒1头虫，以清水为对照，每处理30头幼虫，重复4次，并置于温度（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光周期L∶D=12 h∶12 h的人工气候箱中培养，更换新鲜的浸过病毒液的烟草叶片，感染36 h后以无毒新鲜烟草叶片继续饲养，每24 h调查幼虫死亡数，并收集虫尸体，直至96 h，计算死亡率。
1.3 数据处理
死亡率和校正死亡率分别根据公式（1）和公式（2）计算。
2 结果与分析
2.1 核型多角体病毒对2种夜蛾卵的毒力试验结果
经过核型多角体病毒液处理过的两种夜蛾卵，在24 h
时陆续孵化，在48 h达到孵化高峰期，72 h后卵出现干瘪，且不能正常孵化。从表1可以看出，清水对照组的斜纹夜蛾、棉铃虫卵孵化率最高，分别为95.00%、95.83%，其余经3种核型多角体病毒处理过的卵，其孵化率
均≥91.67%，低于清水对照，但未达到显著水平，说明核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫卵的孵化没有明显的抑制作用。
经核型多角体病毒处理过的卵孵化成幼虫的校正死亡率如图1所示，而SpliNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为91.41%、76.70%，HaNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为79.67%、93.51%，SpliNPV（郴州）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分別为90.70%、76.06%。
2.2 核型多角体病毒对2种夜蛾2龄幼虫的毒力试验结果
3种核型多角体病毒对斜纹夜蛾和棉铃虫2龄幼虫的毒力存在一定的差异，在取食带毒叶片24 h后，各处理组幼虫陆续出现死亡现象，随着取食时间的延长，斜纹夜蛾和棉铃虫幼虫的死亡率逐渐上升。由图2可知，斜纹夜蛾2龄幼虫喂毒72 h后，SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）、HaNPV（科云）处理组校正死亡率分别为88.03%、88.89%、75.21%，其中SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）两种病毒对斜纹夜蛾低龄幼虫的致死率相当。棉铃虫2龄幼虫喂毒72 h后，HaNPV（科云）、SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）处理组校正死亡率分别为91.00%、72.88%、77.12%，HaNPV（科云）对棉铃虫低龄幼虫的致死率最高。
死亡率（72 h）
3 结论与讨论
近年的监测数据显示，湖南部分烟区烟田棉铃虫、斜纹夜蛾的发生量呈逐年上升趋势。常规的化学防治虽然见效快，但长期使用易产生抗药性，且可能污染环境，杀伤天敌。目前在烟草害虫防治上，核型多角体病毒杀虫剂占据了比较重要的位置。试验结果表明，经核型多角体病毒处理过的斜纹夜蛾和棉铃虫的卵，因幼虫孵化后会取食卵壳，在这个过程中将卵壳上少量的病毒也摄入体内，导致其死亡。
参考文献：
[1] 朱贤朝，王彦亭，王智发.中国烟草病虫害防治手册[M].北京：中国农业出版社，2002：82-103.
[2] 黄志鹏，余剑开，黄必旺，等.斜纹夜蛾核型多角体病毒的分离及感染力测定[J].福建农业大学学报，1998，27（02）：181-184.
[3] 邹金城，杨勇，杨益众，等.斜纹夜蛾核型多角体病毒研究进展[J].中国生物防治学报，2019，32（06）：800-806.
[4] 蒋杰贤，季香云，曾爱平，等.不同温度下斜纹夜蛾感染核型多角体病毒的流行病模型及模拟[J].应用生态学报，2006，17（02）：275-279.
[5] 曾维爱，李小一，邓正平，等.斜纹夜蛾核多角体病毒郴州株的形态学、基因组酶切图谱及生物活性测定[J].中国烟草科学2010，31（03）：41-44.
[6] 江敏华，郑常格，徐树兰，等.虫酰肼对斜纹夜蛾核型多角体病毒的增效作用[J].中国植保导刊，2013，33（08）：53-55.
[7] 冯振群，卢清，李成军.600亿PIB/g棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂防治烟青虫田间试验研究[J].农业灾害研究，2016，6（07）：11-12，15.
[8] 王成燕，钟万芳，刘宝生，等.斜纹夜蛾和甜菜夜蛾核型多角体病毒异源重组后的变异[J].江苏农业学报，2012，28（05）：986-990.
（责任编辑：赵中正）
关键词 核型多角体病毒;斜纹夜蛾;棉铃虫
中图分类号：S481.1 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2021.06.003
斜纹夜蛾（Spodoptera litura）、棉铃虫（Helicoverpa armigera）均为鳞翅目夜蛾科昆虫，幼虫食性复杂，取食量大，寄主植物分布广泛[1-2]。烟草是我国重要的经济作物，其收获物为叶片，夜蛾类幼虫为害烟叶后造成叶片缺刻、破损，甚至将整张叶片完全取食光，严重影响烟草产量和质量，给烟农带来直接经济损失。核型多角体病毒属杆状病毒科核型多角体病毒属，对农林害虫的侵染专一化程度较高，且对天敌、环境、人畜无害，国内外在分离鉴定、毒力测定、致病机理、病毒制剂及田间应用等方面开展了大量研究[3-8]。基于此，研究3种夜蛾科核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫的室内毒力，旨在进一步明确核型多角体病毒杀虫剂对烟草主要害虫的作用机制，拓展夜蛾类新的生物防治措施，为科学、绿色防控烟草害虫提供参考和依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试昆虫
斜纹夜蛾、棉铃虫卵均采自长沙市烟草公司浏阳烟田，饲养条件为（26±1）℃，相对湿度70%±5%，光照（L）∶暗光（D）周期为12 h∶12 h，饲料为新鲜烟叶，于实验室饲养5代以上供试。
1.1.2 供试烟草
品种为云烟87，烟草种植过程中未施用任何农药。
1.1.3 供试药剂
斜纹夜蛾核型多角体病毒SpliNPV郴州株，湖南郴州烟区分离，保存于长沙市烟草公司实验室，
10亿PIB/mL;200亿PIB/mL斜纹夜蛾核型多角体病毒（水分散粒剂）、50亿PIB/mL棉铃虫核型多角体病毒（悬浮剂）均购自科云生物。
1.2 试验方法
1.2.1 核型多角体病毒对2种夜蛾卵的毒力试验
将新鲜饱满的初产卵分别放在浓度为2.0×107 PIBs·mL-1
的供试药剂溶液中浸渍10 s后用吸水纸将多余的药液吸干，室温晾干后，将卵刷到培养皿中，并置于温度（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光周期L∶D=12 h∶12 h
的人工气候箱中培养，记录卵的孵化情况，以清水为对照，每处理30粒卵，重复4次，共120粒卵。孵化出来的幼虫及时挑出转移至透明饲养盒，用新鲜烟叶喂饲，记录幼虫死亡情况，直至幼虫进入3龄期。
1.2.2 核型多角体病毒对2种夜蛾2龄幼虫的毒力试验
将烟草叶片剪成4 cm×4 cm大小的正方形，分别放在浓度为2.0×107 PIBs·mL-1的供试药剂溶液中浸渍10 s于室温下晾干后置于塑料盒中，挑选同批孵化的大小一致的2龄初期幼虫于烟叶上，每盒1头虫，以清水为对照，每处理30头幼虫，重复4次，并置于温度（26±1）℃、相对湿度70%±5%、光周期L∶D=12 h∶12 h的人工气候箱中培养，更换新鲜的浸过病毒液的烟草叶片，感染36 h后以无毒新鲜烟草叶片继续饲养，每24 h调查幼虫死亡数，并收集虫尸体，直至96 h，计算死亡率。
1.3 数据处理
死亡率和校正死亡率分别根据公式（1）和公式（2）计算。
2 结果与分析
2.1 核型多角体病毒对2种夜蛾卵的毒力试验结果
经过核型多角体病毒液处理过的两种夜蛾卵，在24 h
时陆续孵化，在48 h达到孵化高峰期，72 h后卵出现干瘪，且不能正常孵化。从表1可以看出，清水对照组的斜纹夜蛾、棉铃虫卵孵化率最高，分别为95.00%、95.83%，其余经3种核型多角体病毒处理过的卵，其孵化率
均≥91.67%，低于清水对照，但未达到显著水平，说明核型多角体病毒对斜纹夜蛾、棉铃虫卵的孵化没有明显的抑制作用。
经核型多角体病毒处理过的卵孵化成幼虫的校正死亡率如图1所示，而SpliNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为91.41%、76.70%，HaNPV（科云）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分别为79.67%、93.51%，SpliNPV（郴州）浸卵处理后，对斜纹夜蛾、棉铃虫的校正死亡率分別为90.70%、76.06%。
2.2 核型多角体病毒对2种夜蛾2龄幼虫的毒力试验结果
3种核型多角体病毒对斜纹夜蛾和棉铃虫2龄幼虫的毒力存在一定的差异，在取食带毒叶片24 h后，各处理组幼虫陆续出现死亡现象，随着取食时间的延长，斜纹夜蛾和棉铃虫幼虫的死亡率逐渐上升。由图2可知，斜纹夜蛾2龄幼虫喂毒72 h后，SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）、HaNPV（科云）处理组校正死亡率分别为88.03%、88.89%、75.21%，其中SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）两种病毒对斜纹夜蛾低龄幼虫的致死率相当。棉铃虫2龄幼虫喂毒72 h后，HaNPV（科云）、SpliNPV（科云）、SpliNPV（郴州）处理组校正死亡率分别为91.00%、72.88%、77.12%，HaNPV（科云）对棉铃虫低龄幼虫的致死率最高。
死亡率（72 h）
3 结论与讨论
近年的监测数据显示，湖南部分烟区烟田棉铃虫、斜纹夜蛾的发生量呈逐年上升趋势。常规的化学防治虽然见效快，但长期使用易产生抗药性，且可能污染环境，杀伤天敌。目前在烟草害虫防治上，核型多角体病毒杀虫剂占据了比较重要的位置。试验结果表明，经核型多角体病毒处理过的斜纹夜蛾和棉铃虫的卵，因幼虫孵化后会取食卵壳，在这个过程中将卵壳上少量的病毒也摄入体内，导致其死亡。
参考文献：
[1] 朱贤朝，王彦亭，王智发.中国烟草病虫害防治手册[M].北京：中国农业出版社，2002：82-103.
[2] 黄志鹏，余剑开，黄必旺，等.斜纹夜蛾核型多角体病毒的分离及感染力测定[J].福建农业大学学报，1998，27（02）：181-184.
[3] 邹金城，杨勇，杨益众，等.斜纹夜蛾核型多角体病毒研究进展[J].中国生物防治学报，2019，32（06）：800-806.
[4] 蒋杰贤，季香云，曾爱平，等.不同温度下斜纹夜蛾感染核型多角体病毒的流行病模型及模拟[J].应用生态学报，2006，17（02）：275-279.
[5] 曾维爱，李小一，邓正平，等.斜纹夜蛾核多角体病毒郴州株的形态学、基因组酶切图谱及生物活性测定[J].中国烟草科学2010，31（03）：41-44.
[6] 江敏华，郑常格，徐树兰，等.虫酰肼对斜纹夜蛾核型多角体病毒的增效作用[J].中国植保导刊，2013，33（08）：53-55.
[7] 冯振群，卢清，李成军.600亿PIB/g棉铃虫核型多角体病毒水分散粒剂防治烟青虫田间试验研究[J].农业灾害研究，2016，6（07）：11-12，15.
[8] 王成燕，钟万芳，刘宝生，等.斜纹夜蛾和甜菜夜蛾核型多角体病毒异源重组后的变异[J].江苏农业学报，2012，28（05）：986-990.
（责任编辑：赵中正）