小鼠S1PR3慢病毒表达载体的构建及表达

来源 :海南医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：marshal

【摘要】

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目的：构建小鼠1-磷酸鞘氨醇受体3（S1PR3）慢病毒表达载体，并检测其表达情况。方法小鼠心肌组织mRNA并逆转录得到cDNA，设计并合成引物，采用亚克隆方式将目的基因克隆至慢病毒表达载体

【作者】

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王航蔡克银黄浩

【机构】

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广州军区武汉总医院干部病房二科,深圳市合一康生物科技有限公司临床医学中心

【出处】

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海南医学

【发表日期】

：

2015年18期

【关键词】

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慢病毒 1-磷酸鞘氨醇受体3 血管损伤再内皮化 Lentivirus Sphingosine-1-phosphate receptor 3 （S 1PR3）

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目的：构建小鼠1-磷酸鞘氨醇受体3（S1PR3）慢病毒表达载体，并检测其表达情况。方法小鼠心肌组织mRNA并逆转录得到cDNA，设计并合成引物，采用亚克隆方式将目的基因克隆至慢病毒表达载体pLent-IRES-EGFP中，将表达载体与包装质粒共转293T细胞，进行目的基因的过表达慢病毒包装，随后收集培养成功病毒，使用病毒感染小鼠L929细胞，检测感染后L929细胞表达S1PR3情况。结果从小鼠心机组织cDNA中扩增出大小约1100 bp的目的片段；双酶切后成功将S1PR3克隆到慢病毒表达载体pLent-I

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