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将绿色荧光蛋白基因编码区序列克隆到大肠杆菌-裂殖酵母穿梭质粒pREP3的BamHⅠ ̄SmaⅠ位点,使之位于一个受硫胺素抑制的启动子和终止子的控制之下,用该质粒转化裂殖酵母,转化菌落于阳光下呈绿色,在395nm紫外光下发出强烈绿色荧光,在荧光显微镜下,用蓝光激发,可见该基因的表达明显受硫胺素的抑制,在没有选择压力的条件下,质粒丢失现象很严重,在完全培养基上,只有20%的细胞发光,在丰富培养基上,发光