p52在结肠癌细胞对奥沙利铂耐药中的作用

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaoxi0504
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目的

观察p52在结肠癌细胞对奥沙利铂耐药中的作用。

方法

复苏结肠癌SW480、LoVo细胞、奥沙利铂处理细胞24 h,Western blot法检测SW480细胞中p52蛋白表达以研究奥沙利铂对p52蛋白的作用。采用大剂量冲击法诱导结肠癌耐奥沙利铂细胞,细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测其耐药性。Western blot检测原代耐药细胞p52表达,染色质免疫共沉淀(CHIP)实验检测p52能否转录调控B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)。沉默耐药细胞中p52后,Western blot检测细胞内p52和bcl-2表达,膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)染色、流式细胞术检测Annexin V(+)/PI(+)细胞的比例。SPSS 23.0统计软件进行统计分析。

结果

奥沙利铂上调结肠癌细胞中p52表达(t=20.730,P=0.002),p52蛋白在结肠癌耐奥沙利铂细胞中明显升高(t=4.029,P=0.006),差异均有统计学意义。CHIP实验结果显示p52蛋白结合到bcl-2基因启动子区域,转录调控bcl-2基因。沉默耐药细胞中p52后,bcl-2蛋白表达下调22.6%(t=18.183,P=0.003),流式细胞术提示实验组凋亡细胞比例为23.5%,比对照组升高了2.96倍(t=6.783,P=0.021)。

结论

p52通过通过上调bcl-2基因抑制细胞凋亡促使结肠癌细胞对奥沙利铂耐药。

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