【摘 要】
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目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞(hAECs)向肝细胞样细胞分化的能力.方法:采用地塞米松(Dex),HGF,IGF等细胞因子联合诱导hAECs向肝细胞样细胞分化,诱导周期为2
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目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞(hAECs)向肝细胞样细胞分化的能力.方法:采用地塞米松(Dex),HGF,IGF等细胞因子联合诱导hAECs向肝细胞样细胞分化,诱导周期为2周,诱导过程中采用RT-PCR鉴定albumin(ALB),CYP1A1,CYP1A2,IGFR,c-met等肝细胞相关关键功能基因及HNF3,HNF4和C/EBPa 3种转录因子的表达,流式细胞术分析集落细胞表面标记ALB,AFP和CK18的时程变化.结果:诱导2周后hAECs表达ALB,CYP1A1,CYP1A2,c-met等肝细胞功能基因及HNF3,HNF4,C/EBPa,HNF1等转录因子,且功能基因随诱导天数的增加其表达逐渐增强;细胞表面标记检测发现:诱导第6天时,hAECs主要表达AFP+,为(15.1±2.1)%;随着诱导时间的延长,第10天时hAECs表达AFP+/ALB+,为(6.5±1.4)%;而诱导第14天时,hAECs基本上只表达ALB+,为(13.9±2.3)%.诱导第10天时的hAECs开始表达ALB+/CK18+;为(2.5±1.4)%;诱导第14天时,细胞依然表达ALB+/CK18+,且这种双阳性的细胞量有明显增加,为(18.9±3.1)%;同时CK18+细胞数并没有明显减少,诱导第10天时,CK18+细胞数为(16.1±1.2)%;诱导第14天时,CK18+细胞数为(21.3±4.6)%.提示诱导过程中的hAECs随着诱导时间的延长有一个逐渐成熟的过程.结论:体外诱导的hAECs具有分化为肝细胞样细胞的特性.
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