人IL-16的原核表达及活性检测

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用RT PCR方法将人IL 16基因的活性区段 (783 1187bp )克隆至pBluescriptSK (+ )载体 ,测序验证后 ,克隆至原核表达载体pT7 7His ,并在大肠杆菌中进行了高效表达。表达产物为可溶性蛋白 ,分子量约为 18kD ,通过Ni+离子亲和层析一次性纯化。Westernblot检测证实其具IL 16免疫原性 ,FACS检测证实该rhIL 16具促CD4+细胞增殖活性。 The active segment of human IL-16 gene (7831187bp) was cloned into pBluescriptSK (+) vector by RT-PCR and verified by sequencing. The recombinant plasmid was cloned into prokaryotic expression vector pT7 7His and expressed in E.coli. The expressed product was a soluble protein with a molecular weight of about 18 kD and was purified once by Ni + ion affinity chromatography. The results of Western blot showed that IL16 immunogenicity was confirmed by FACS analysis.
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