农杆菌介导枳壳转化系统的建立及PCR鉴定

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目的建立农杆菌介导的枳壳转化体系.方法以枳壳实生苗上胚轴为转化外植体,农杆菌Ti质粒上插入了外源目的基因--柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因(CTV-cp),转化植株用GUS(β-葡萄苷酸酶)染色及PCR进行鉴定.结果枳壳转化试验中,20 d苗龄的外植体转化再生率较高;外植体与农杆菌共培养时间以2~3 d为宜;乙酰丁香酮能较大提高转化效率,转化再生频率为27.5%.转化获得的抗性植株中,GUS反应呈阳性所占比例为70.0%.PCR分析证实外源目的基因已整合到枳壳转化株的核基因组中.结论成功地建立了农杆菌介导的枳
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