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根据人神经营养素-3(Human neurotrohin-3,hNT-3)的基因序列,把编码氨基酸的密码子转换成毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱的形式,设计了10条36~59nt的寡聚核苷酸引物,通过5次连续PCR反应,获得了人工合成的NT-3 cDNA片段(简称NT-3b基因).将合成的NT-3b基因克隆到pPIC9K质粒上,获得重组表达载体pPIC9K-NT-3b.将重组表达载体pPIC9K-NT-3b和pPIC9K-hNT-3分别电击转化宿主毕赤酵母GS115菌株,经筛选得到重组转化子