芋头过氧化物酶基因克隆

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根据芋头的密码子使用频率,用iCODEHOP设计简并引物扩增芋头过氧化物酶基因序列,待芋头过氧化物酶基因非侧翼序列扩增成功后,依据其序列合成hiTAIL—PCR引物扩增芋头过氧化物酶基因的两侧序列。结果从芋头基因组DNA中克隆出1165bp序列,经同源性分析为过氧化物酶基因的部分序列;再利用hiTAIL—PCR技术可以扩增出芋头过氧化物酶基因的两侧序列,扩增序列为689bp,测序结果能与1165bp序列拼接到一起,长1854bp。与已知的过氧化物酶进行序列比对,发现两侧还有氨基酸的编码序列,因此进行第2次
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