Caspase-3 siRNA减少骨髓间充质干细胞稳定株细胞凋亡的实验研究

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目的探讨在体外采用Caspase-3小干扰核糖核酸(siRNA)减少骨髓间充质干细胞(MSC)稳定株细胞凋亡的方法,以构建稳定表达的MSC细胞株。方法使用逆转录病毒包装系统,在293FT细胞中进行包装生产含Caspase-3 siRNA的病毒颗粒,然后转染给大鼠MSC,对转染后的细胞进行筛选并扩增培养得到稳定株细胞。根据逆转录病毒的特性,利用蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)对细胞株进行稳定表达的鉴定,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记
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