牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因重组卡介苗的构建

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本试验将成功克隆的牛病毒性腹泻-黏膜病病毒Changchun 184株E2基因与大肠杆菌-分枝杆菌整合表达载体pMV361连接,构建重组整合质粒pMV361-E2.并确定了电转化的最佳条件:2.0 kV/cm、25 μF、1 000Ω,成功获得了E2基因重组卡介苗.在45 ℃下热诱导E2基因在重组卡介苗中的表达,通过SDS-PAGE电泳和免疫印迹检测,结果显示,在44 kD处出现目的条带,符合E2基因表达蛋白的大小,表明牛病毒性腹泻-黏膜病病毒E2基因在卡介苗中成功表达.
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