【摘 要】
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用PCR技术从腐蹄病C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原0.85kb纤毛蛋白基因(pili基因),利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体.提取C型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专
【机 构】
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吉林特产高等专科学校,中国农业科学院特产研究所
【基金项目】
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科技部研究所技术开发研究专项基金
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用PCR技术从腐蹄病C型节瘤拟杆菌克隆出具有免疫保护性抗原0.85kb纤毛蛋白基因(pili基因),利用该基因构建了纤毛蛋白基因表达载体.提取C型节瘤拟杆菌染色体DNA;用所设计的专一性引物进行PCR,扩增出pili基因;将pili基因克隆于TE载体,TE-pili重组质粒pili基因序列测定结果正确,用EcoRⅠ酶切,低熔点胶回收pili基因片段,经klenow补平后,用T4DNA连接酶将其与中间载体pPL连接,将plli基因克隆于pPLλ载体,经BamH I、BamH I+HndⅢ、Dral酶切鉴定p
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