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目的:构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.方法:用AdEasy-1TM系统,在大肠杆菌中同源重组,构建表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-LacZ).重组腺病毒在HEK293细胞内包装并扩增,测定病毒滴度、电镜鉴定病毒存在、斑点杂交检测其复制缺陷性,然后感染HeLa细胞X-gal染色检测LacZ的表达情况.结果:成功构建了重组LacZ腺病毒表达载体,包装获得的重组腺病毒的滴度为1.58×109PFU/ml.在转染的细胞和感染的靶细胞内均可检测到LacZ的表达.电镜下可见感染的HEK293细胞核内含晶格状结构的腺病毒包函体.斑点杂交提示重组病毒为复制缺陷型,其基因转移百分率和感染强度和感染时间有一定的相关性.结论:成功构建了表达LacZ基因的复制缺陷型腺病毒.