从腰椎弓板和棘突分离培养人骨髓间充质干细胞的研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wsw62084751
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目的

探讨从人腰椎弓板和棘突分离培养人骨髓间充质干细胞(hMSCs)的可行性。

方法

采用密度梯度离心法,从3例人腰椎弓板和棘突中分离和培养hMSCs,并以1例从髂骨内分离的hMSCs作为对照,观察hMSCs的形态和传代能力,以流式细胞仪检测其表面标记,采用不同的诱导培养基研究并比较其向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化的能力。应用Stata 10.0统计软件进行分析。

结果

在人腰椎弓板和棘突中分离的hMSCs呈现典型间充质干细胞的形态,第6代和第2代细胞之间的老化细胞数比较差异无统计学意义(6.500±1.384比6.500±1.258,t=0.000,P>0.05),经诱导可向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。其向成骨细胞分化时的茜素红染色阳性面积像素值显著低于对照hMSCs(32.658±3.14比61.362±8.952,t=6.674,P<0.01);在成脂肪细胞分化时,单位面积的油红染色阳性细胞数显著多于对照hMSCs(27.250±2.493比7.750±1.753,t=18.100,P<0.01);在三维培养下形成的肥大软骨细胞数I-hMSCs和L-hMSCs比较差异无统计学意义(18.833±3.933比19.500±5.252,t=0.227,P>0.05)。

结论

从人的腰椎弓板和棘突可以分离hMSCs,其细胞特征和髂骨来源的hMSCs相同。在hMSCs的成骨分化和成脂肪分化之间存在反向关联。

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