论文部分内容阅读
鳗鳅别名台湾泥鳅，是台湾地区改良的泥鳅新品种，其分类地位暂不明确[1]。最大的特点就是生长速度快，3 cm左右稚鱼经过3个月人工养殖后，体重达到50 g/尾以上。目前河北省养殖鳗鳅还处在起步阶段，农户养殖热情很高。为了推动鳗鳅养殖的发展，在石家庄鹿泉康态中华鳖良种场进行了大棚鳗鳅的人工繁育，对其胚胎发育进行了观察研究，以充实鳗鳅生物学基础资料。
1 材料与方法
1.1 材料来源
2014年7月从广州市华轩水产有限公司购入鳗鳅夏花（其亲本从台湾直接引进），在养鳖棚中进行养殖并越冬。2015年4月初大棚水温稳定在21 ℃左右时，选择性成熟的体重在90 g以上个体做亲本，进行了人工催产授精，获得受精卵。
1.2 样品采集与观察
在解剖镜下（3～5）×10倍连续活体观察，选择各个时期的典型特征用OPTPro软件拍摄成像。每次观察的卵数量不少于30粒。孵化过程中每隔1 h记录孵化水温。
1.3 试验孵化条件
取约200粒新受精卵暂养在1 L的烧杯中，烧杯通过泡沫板稳定在水族箱中，水温在21～22 ℃范围内，通过加热棒控温。观察过程中换等温水3次，用水经滤纸加脱脂棉过滤。
2 结果与分析
2.1 鳗鳅胚胎发育时序
在水温21～22 ℃范围内，鳗鳅卵自受精到孵化出膜历时29 h左右。参照鱼类胚胎的相关文献，将鳗鳅胚胎发育分为6个阶段，观察到27时期。
6个阶段为受精卵阶段、卵裂阶段、囊胚阶段、原肠阶段、神经胚阶段、器官形成阶段（见表1和图版）[2]。其中受精卵耗时30 min，卵裂历时3 h 50 min，囊胚3 h ，原肠期6 h 10 min，神经胚1 h 30 min，器官形成至破膜经历14 h。
2.2 受精卵
鳗鳅的卵呈圆球形，黄色，半粘性。吸水后形成卵间隙，卵径为0.85～0.95 mm（图版1）。精子进入卵子后，卵子受精子的作用而激活，原生质逐渐向动物极移动和集中。受精约30 min后，在动物极形成一个隆起的胚盘，即1细胞期。从此细胞进入卵裂期。
2.3 卵裂期
2.3.1 二胞期 受精45 min后，在胚盘的正上方出现一纵向的分裂沟，分裂沟不断加深将胚盘分割成两个大小相等的分裂球，即2细胞期（图版3）。
2.3.2 四胞期 受精1 h 20 min后，发生第二次分裂，与第一次分裂相垂直，形成4个等大的细胞，进入4细胞期（图版4）。
2.3.3 八细胞期 受精1 h 40 min后，进行第三次卵裂，与第一次的分裂面平行，形成大小相似的8个分裂球（图版5），胚盘呈长方形。
2.3.4 十六细胞期 受精1 h 55 min进行第四次卵裂，与二次分裂面平行，形成大小相似的16细胞（图版6）。
经过32、64、128细胞，继续进行分裂，细胞越来越小，排列规律亦不明显。受精3 h 50 min后，分裂的多层细胞高高地举在卵黄上方，形似桑椹，即桑椹胚，此时细胞界限清楚（图版7、8、9、10）。
2.4 囊胚期
2.4.1 囊胚早期 受精4 h 20 min后，胚胎细胞不断分裂，分裂球越来越小，细胞界限不清楚，有很多分裂球堆积在卵黄囊上方，此时隆起最高，中间为囊胚腔，胚盘边缘与卵黄囊交界清晰，此时期为囊胚早期（图版11）。
2.4.2 囊胚中期 此后囊胚细胞继续不断分裂，分裂球变小，细胞间的界限逐渐模糊不清。受精5 h 10 min后，胚胎边缘细胞不断增多，胚盘面积不断扩大，并开始下包，囊胚顶变得稍扁平，进入囊胚中期（图版12）。
2.4.3 囊胚晚期 受精6 h 20 min后，胚胎细胞继续下包，胚盘高度下降变为扁平紧贴在卵黄囊上方，外形上似受精卵刚形成胚盘，进入囊胚晚期（图版13）。
2.5 原肠期
2.5.1 原肠早期 受精7 h 20 min后，囊胚细胞向植物极扩展，边缘细胞向胚盘边缘流动，外包并内卷形成一圈环状隆起即胚环。胚胎细胞下包到卵黄的1/2，进入原肠早期（图版14）。
2.5.2 原肠中期 受精8 h 30 min后，胚盘细胞下包至卵黄囊2/3处，进入原肠中期（图版15）。
2.5.3 原肠晚期 受精11 h 20 min后，胚盘细胞下包至卵黄的3/4处，（图版16）。
2.6 神经胚期
发育至13 h 30 min，胚体中线形成神经索，脑部逐渐膨大，胚盘下包至卵黄囊底部，下包4/5，植物极部分露出胚环以外，形成卵黄栓（图版17）。
2.7 器官形成期
2.7.1 胚孔封闭期 胚孔继续收缩，受精后15 h左右时，胚孔完全封闭，此时，胚体已初步形成，卵黄内收（图版18）。
2.7.2 肌节出现期 胚体经过16 h 40 min发育出现3对肌节，头部膨大（图版19）。
2.7.3 眼基出現期 胚体经过18 h后在前脑两侧，有一对长肾形突起，即眼的原基，此时胚体增厚，体节6对（图版20）。
2.7.4 眼囊期 胚体经过18 h 55 min发育后眼轮廓更加清晰凸出，长椭圆形，体节出现9对。此时鱼体头部膨大明显，分为前、中、后三部分（图版21）。
2.7.5 尾牙期 胚体经过20 h 35 min发育，尾牙出现，体节15对（图版22）。 2.7.6 尾泡出现期 胚胎经过21 h 30 min发育，尾端出现空泡，为尾泡（图版23）。
2.7.7 尾鳍出现期 胚胎经过23 h 05 min，卵黄内缩，尾鳍上翘（图版24）。
2.7.8 晶体出现期 受精23 h 45 min后，卵黄深内凹，眼囊轮廓清晰，且眼囊逐渐变圆。眼囊中间出现圆形的晶囊。眼囊随着胚胎发育不断扩大并向外伸展，在眼囊与脑相连处形成较细的眼柄，眼囊继续向外突出抵达与其相连的外胚层，通过外胚层的诱导作用，使眼囊内陷而形成双层壁的眼杯，此后，通过诱导作用，逐渐形成眼的水晶体（图版25）。
2.7.9 肌肉效应期 受精24 h 30 min后，出现肌肉收缩现象，间隔一段时间身体收缩几下（图版26）。
2.7.10 出膜期 随着胚胎发育胚体在卵膜内不停摆动，肌肉扭动更加频繁有力，经过大约29 h的胚胎发育，胚体破膜而出，大多数头部首先破膜。卵黄囊由圆形变为椭圆形。孵出后仔鱼侧卧水底，遇到惊吓靠尾部摆动而垂直上浮（图版27、28）。
3 小结与讨论
鱼类的胚胎发育具有种的特异性，主要受遗传因素的影响。根据鳗鳅胚胎发育的外部形态及其典型特征，将鳗鳅胚胎发育分为6个阶段，观察到27个发育时期。
通常在一定的温度范围内，温度越高，发育越快，在胚胎发育过程中，温度直接影响发育的速率，鳗鳅卵在21～22 ℃下发育需要29 h左右破膜。
与梁秩燊[3]观察的大鳞副泥鳅（Paramisgurnus）胚胎发育相似，肌节出现期在眼基出现期之前。关于心跳期与邱楚雯[1]观察到的有出入，没有观察到膜内心跳期，有待进一步探究。
1.受精卵；2.1细胞期；3.2细胞期；4.4细胞期；5.8细胞期； 6.16细胞期（侧面观、正面观）7.32细胞期；8.64细胞期；9.128细胞期；10.桑椹期（正面观）；11.囊胚早期；12.囊胚中期；13.囊胚晚期；14.原肠早期；15.原肠中期；16.原肠晚期；17.神经胚期；18.胚孔封闭期；19.体节出现期；20.眼基出现期；21.眼囊出现期；22.尾芽期；23.尾泡出现期；24.尾鳍出现期；25.晶体出现期；26.肌肉效应期； 27.出膜期；28.初孵仔鱼
图版：鳗鳅的胚胎发育
心脏原基期
参考文献：
[1]
邱楚雯，王韩信，陈迪虎，等.台湾泥鳅人工繁殖及早期发育的研究[J].水产科技情报，2014，41（6）：284-289
[2] 林彬，黄宗文，骆剑，等.棕点石斑鱼胚胎发育的观察[J].海南师范大学学报：自然科学版，2010（1）：87-92
[3] 梁秩燊，梁坚勇，陈朝，等.大鳞副泥鳅的胚胎发育及鱼种培育[J].水生生物学报，1988（1）：27-42
（收稿日期：2015-09-24）
1 材料与方法
1.1 材料来源
2014年7月从广州市华轩水产有限公司购入鳗鳅夏花（其亲本从台湾直接引进），在养鳖棚中进行养殖并越冬。2015年4月初大棚水温稳定在21 ℃左右时，选择性成熟的体重在90 g以上个体做亲本，进行了人工催产授精，获得受精卵。
1.2 样品采集与观察
在解剖镜下（3～5）×10倍连续活体观察，选择各个时期的典型特征用OPTPro软件拍摄成像。每次观察的卵数量不少于30粒。孵化过程中每隔1 h记录孵化水温。
1.3 试验孵化条件
取约200粒新受精卵暂养在1 L的烧杯中，烧杯通过泡沫板稳定在水族箱中，水温在21～22 ℃范围内，通过加热棒控温。观察过程中换等温水3次，用水经滤纸加脱脂棉过滤。
2 结果与分析
2.1 鳗鳅胚胎发育时序
在水温21～22 ℃范围内，鳗鳅卵自受精到孵化出膜历时29 h左右。参照鱼类胚胎的相关文献，将鳗鳅胚胎发育分为6个阶段，观察到27时期。
6个阶段为受精卵阶段、卵裂阶段、囊胚阶段、原肠阶段、神经胚阶段、器官形成阶段（见表1和图版）[2]。其中受精卵耗时30 min，卵裂历时3 h 50 min，囊胚3 h ，原肠期6 h 10 min，神经胚1 h 30 min，器官形成至破膜经历14 h。
2.2 受精卵
鳗鳅的卵呈圆球形，黄色，半粘性。吸水后形成卵间隙，卵径为0.85～0.95 mm（图版1）。精子进入卵子后，卵子受精子的作用而激活，原生质逐渐向动物极移动和集中。受精约30 min后，在动物极形成一个隆起的胚盘，即1细胞期。从此细胞进入卵裂期。
2.3 卵裂期
2.3.1 二胞期 受精45 min后，在胚盘的正上方出现一纵向的分裂沟，分裂沟不断加深将胚盘分割成两个大小相等的分裂球，即2细胞期（图版3）。
2.3.2 四胞期 受精1 h 20 min后，发生第二次分裂，与第一次分裂相垂直，形成4个等大的细胞，进入4细胞期（图版4）。
2.3.3 八细胞期 受精1 h 40 min后，进行第三次卵裂，与第一次的分裂面平行，形成大小相似的8个分裂球（图版5），胚盘呈长方形。
2.3.4 十六细胞期 受精1 h 55 min进行第四次卵裂，与二次分裂面平行，形成大小相似的16细胞（图版6）。
经过32、64、128细胞，继续进行分裂，细胞越来越小，排列规律亦不明显。受精3 h 50 min后，分裂的多层细胞高高地举在卵黄上方，形似桑椹，即桑椹胚，此时细胞界限清楚（图版7、8、9、10）。
2.4 囊胚期
2.4.1 囊胚早期 受精4 h 20 min后，胚胎细胞不断分裂，分裂球越来越小，细胞界限不清楚，有很多分裂球堆积在卵黄囊上方，此时隆起最高，中间为囊胚腔，胚盘边缘与卵黄囊交界清晰，此时期为囊胚早期（图版11）。
2.4.2 囊胚中期 此后囊胚细胞继续不断分裂，分裂球变小，细胞间的界限逐渐模糊不清。受精5 h 10 min后，胚胎边缘细胞不断增多，胚盘面积不断扩大，并开始下包，囊胚顶变得稍扁平，进入囊胚中期（图版12）。
2.4.3 囊胚晚期 受精6 h 20 min后，胚胎细胞继续下包，胚盘高度下降变为扁平紧贴在卵黄囊上方，外形上似受精卵刚形成胚盘，进入囊胚晚期（图版13）。
2.5 原肠期
2.5.1 原肠早期 受精7 h 20 min后，囊胚细胞向植物极扩展，边缘细胞向胚盘边缘流动，外包并内卷形成一圈环状隆起即胚环。胚胎细胞下包到卵黄的1/2，进入原肠早期（图版14）。
2.5.2 原肠中期 受精8 h 30 min后，胚盘细胞下包至卵黄囊2/3处，进入原肠中期（图版15）。
2.5.3 原肠晚期 受精11 h 20 min后，胚盘细胞下包至卵黄的3/4处，（图版16）。
2.6 神经胚期
发育至13 h 30 min，胚体中线形成神经索，脑部逐渐膨大，胚盘下包至卵黄囊底部，下包4/5，植物极部分露出胚环以外，形成卵黄栓（图版17）。
2.7 器官形成期
2.7.1 胚孔封闭期 胚孔继续收缩，受精后15 h左右时，胚孔完全封闭，此时，胚体已初步形成，卵黄内收（图版18）。
2.7.2 肌节出现期 胚体经过16 h 40 min发育出现3对肌节，头部膨大（图版19）。
2.7.3 眼基出現期 胚体经过18 h后在前脑两侧，有一对长肾形突起，即眼的原基，此时胚体增厚，体节6对（图版20）。
2.7.4 眼囊期 胚体经过18 h 55 min发育后眼轮廓更加清晰凸出，长椭圆形，体节出现9对。此时鱼体头部膨大明显，分为前、中、后三部分（图版21）。
2.7.5 尾牙期 胚体经过20 h 35 min发育，尾牙出现，体节15对（图版22）。 2.7.6 尾泡出现期 胚胎经过21 h 30 min发育，尾端出现空泡，为尾泡（图版23）。
2.7.7 尾鳍出现期 胚胎经过23 h 05 min，卵黄内缩，尾鳍上翘（图版24）。
2.7.8 晶体出现期 受精23 h 45 min后，卵黄深内凹，眼囊轮廓清晰，且眼囊逐渐变圆。眼囊中间出现圆形的晶囊。眼囊随着胚胎发育不断扩大并向外伸展，在眼囊与脑相连处形成较细的眼柄，眼囊继续向外突出抵达与其相连的外胚层，通过外胚层的诱导作用，使眼囊内陷而形成双层壁的眼杯，此后，通过诱导作用，逐渐形成眼的水晶体（图版25）。
2.7.9 肌肉效应期 受精24 h 30 min后，出现肌肉收缩现象，间隔一段时间身体收缩几下（图版26）。
2.7.10 出膜期 随着胚胎发育胚体在卵膜内不停摆动，肌肉扭动更加频繁有力，经过大约29 h的胚胎发育，胚体破膜而出，大多数头部首先破膜。卵黄囊由圆形变为椭圆形。孵出后仔鱼侧卧水底，遇到惊吓靠尾部摆动而垂直上浮（图版27、28）。
3 小结与讨论
鱼类的胚胎发育具有种的特异性，主要受遗传因素的影响。根据鳗鳅胚胎发育的外部形态及其典型特征，将鳗鳅胚胎发育分为6个阶段，观察到27个发育时期。
通常在一定的温度范围内，温度越高，发育越快，在胚胎发育过程中，温度直接影响发育的速率，鳗鳅卵在21～22 ℃下发育需要29 h左右破膜。
与梁秩燊[3]观察的大鳞副泥鳅（Paramisgurnus）胚胎发育相似，肌节出现期在眼基出现期之前。关于心跳期与邱楚雯[1]观察到的有出入，没有观察到膜内心跳期，有待进一步探究。
1.受精卵；2.1细胞期；3.2细胞期；4.4细胞期；5.8细胞期； 6.16细胞期（侧面观、正面观）7.32细胞期；8.64细胞期；9.128细胞期；10.桑椹期（正面观）；11.囊胚早期；12.囊胚中期；13.囊胚晚期；14.原肠早期；15.原肠中期；16.原肠晚期；17.神经胚期；18.胚孔封闭期；19.体节出现期；20.眼基出现期；21.眼囊出现期；22.尾芽期；23.尾泡出现期；24.尾鳍出现期；25.晶体出现期；26.肌肉效应期； 27.出膜期；28.初孵仔鱼
图版：鳗鳅的胚胎发育
心脏原基期
参考文献：
[1]
邱楚雯，王韩信，陈迪虎，等.台湾泥鳅人工繁殖及早期发育的研究[J].水产科技情报，2014，41（6）：284-289
[2] 林彬，黄宗文，骆剑，等.棕点石斑鱼胚胎发育的观察[J].海南师范大学学报：自然科学版，2010（1）：87-92
[3] 梁秩燊，梁坚勇，陈朝，等.大鳞副泥鳅的胚胎发育及鱼种培育[J].水生生物学报，1988（1）：27-42
（收稿日期：2015-09-24）